应用三磷酸核苷水解酶基因检测弓形虫方法的建立
文献类型: 中文期刊
作者: 王萌;王艳华;蔡志杰;付宝权;李文卉;张德林
作者机构:
关键词: 弓形虫;三磷酸核苷水解酶基因;环介导等温扩增
期刊名称:中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2010 年 12 期
页码: 1223-1227
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 用Primer Explorer V4软件针对弓形虫三磷酸核苷水解酶(NTPase)基因设计了6条环介导等温扩增(LAMP)特异性引物,建立弓形虫LAMP反应体系,并进行特异性和敏感性试验。结果显示,用该反应体系30 min即可检测出弓形虫NTPase基因,产生瀑布状的特异性条带,检测极限为20 copies,敏感性比PCR高10倍。与犬新孢子虫、鹦鹉热衣原体、柔嫩艾美耳球虫、吕氏泰勒虫、羊巴贝斯虫未定种和牛巴贝斯虫间无交叉反应,且重复性良好。应用此方法,可以在攻虫后第2天于试验猪血液中检测出弓形虫,比PCR方法提前2 d。表明将弓形虫NTPase基因作为环介导等温扩增检测弓形虫的目的基因,具有特异性强、敏感性高的特点,是快速诊断弓形虫病的一种新方法。
分类号: S854.43
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