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禽白血病病毒抗体竞争ELISA方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

作者： 朱啟超;张学刚;张进进;任曼;李佳晋;贾艳娥;李升和

作者机构：

关键词： 禽白血病病毒;p27蛋白;原核表达;多克隆抗体;竞争ELISA

期刊名称：甘肃农业大学学报

ISSN： 1003-4315

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 【目的】本研究为了建立一种快速、准确检测禽白血病病毒（Avian Leukosis Virus，ALV）血清抗体的竞争ELISA检测方法， 为ALV血清学监测提供有效工具。【方法】选用ALV衣壳蛋白p27作为包被抗原，以HRP标记的兔抗p27蛋白多克隆抗体作为竞争抗体，优化反应条件，并对所建立方法的敏感性、特异性、重复性及临床符合率进行评价。【结果】该方法确定最佳包被浓度为0.5 μg/mL，最佳封闭液为5% BSA，最佳封闭时间为1 h，待检血清最佳稀释度为2倍稀释，酶标兔多抗使用浓度为0.125 μg/mL，待检血清与酶标抗体最佳竞争时间为30 min，最佳显色时间为5 min。判定标准为抑制率≥64%判为阳性；该方法敏感性为1:8，与其它常见禽病病原阳性血清无交叉反应；批内重复性及批间重复性试验变异系数（CV）均小于10%，临床样品检测与IDEXX商品化试剂盒的总符合率为94.44%，其准确性和灵敏性分别为94.25%和100%。【结论】本研究成功建立了一种快速、特异、重复性良好的ALV抗体竞争ELISA检测方法，为ALV临床样本检测提供有效工具。

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