文献类型： 中文期刊
作者： 郝军红;闫鸣昊;张大俊;张学刚;申超超;徐国伟;李国丽;张克山;郑海学;刘湘涛
作者机构：
关键词： TPL2基因;BHK-21细胞系;口蹄疫病毒;SVV病毒;慢病毒表达系统
期刊名称：中国兽医科学
ISSN： 1673-4696
年卷期： 2019 年 NULL 卷 12 期
页码： 1527-1534
收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2020-2021年度） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）
摘要： 利用慢病毒表达系统将TPL2(COT和MAP3K8)质粒稳定整合在乳仓鼠肾细胞(baby Hamster Syrian kidney)BHK21细胞基因组染色体上,建立稳定表达TPL2的BHK21/TPL2细胞系.构建TPL2质粒,通过基因合成将TPL2基因和慢病毒载体Lv-PCDH连接,得到重组慢病毒载体Lv-TPL2.通过嘌呤霉素筛选得到的阳性细胞株BHK21/TPL2即为稳定表达TPL2蛋白的BHK21细胞株.运用间接免疫荧光、激光扫描共聚焦显微技术、实时荧光定量PCR和普通PCR等技术分别验证TPL2基因组整合、转录、反应活性以及FMDV、SVV在BHK21/TPL2细胞株上的增殖效果.结果,TPL2基因被稳定整合在BHK21细胞基因组染色体上,建立的细胞系连续传代不丢失.接种病毒后致细胞病变严重,相对于正常的BHK21/PCDH细胞,整合有TPL2的BHK21细胞对FMDV、SVV的易感性显著增强.上述结果为FMDV疫苗的研制和生产提供了更佳的功能细胞系.
分类号： S852.65
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