文献类型： 中文期刊
作者： 周婷婷;张伟;刘华南;陈治彤;董星艳;王松豪;曹伟军;郑海学;蒲秀瑛;杨帆
作者机构：
关键词： CRISPR/Cas9;环指蛋白31;敲除细胞系;口蹄疫病毒
期刊名称：微生物学报
ISSN： 0001-6209
年卷期： 2026 年
页码：
收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版）
摘要： 【目的】探究环指蛋白31 （ring finger protein 31， RNF31）在口蹄疫病毒（foot-and-mouth disease virus， FMDV）复制中的功能，为宿主蛋白RNF31调控FMDV复制的分子机制研究提供理论依据。【方法】利用CRISPR/Cas9基因编辑技术在RNF31外显子处设计2条sgRNA序列，通过与pX459-puro载体连接构建重组质粒。将pX459-RNF31-sgRNA转染PK-15细胞，在嘌呤霉素作用下进行筛选，获得RNF31基因敲除细胞系，通过Western blotting、RT-qPCR及TCID50方法检测敲除RNF31基因对FMDV的复制的影响。【结果】RNF31基因敲除细胞系与野生型细胞相比，敲除RNF31基因显著促进FMDV的蛋白水平、mRNA水平和病毒滴度。【结论】本研究成功构建RNF31基因敲除细胞系，证明RNF31在FMDV复制过程中发挥关键作用，该结果为进一步研究RNF31抑制FMDV复制的机制提供数据支撑。
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