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非洲猪瘟病毒K205R蛋白单克隆抗体的制备及功能鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 叶银波;赵倩;黄丹妮;杨洋;孙波涛;程颜;刘永杰;秦晓东;郑海学;周斌

作者机构：

关键词： 非洲猪瘟病毒;K205R蛋白;单克隆抗体;细胞融合技术

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2026 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 为制备非洲猪瘟病毒（ASFV）K205R蛋白单克隆抗体并鉴定其生物学特性，利用细胞融合技术制备抗体，通过免疫印迹、间接免疫荧光、免疫共沉淀试验验证抗体特异性，用间接ELISA测定抗体效价，并进行亚型鉴定，最后通过中和试验鉴定其病毒中和活性。结果表明：真核表达的K205R蛋白大小在23ku左右，与预测大小一致；筛选获得5株针对K205R蛋白的单克隆抗体细胞株，免疫印迹显示5株单克隆抗体对ASFV感染细胞样品中的K205R蛋白有较强的特异性反应，不与口蹄疫病毒感染样品发生交叉反应；间接免疫荧光试验进一步证实，5株单克隆抗体对细胞中转染或ASFV感染产生的K205R蛋白具有特异性识别能力；间接ELISA测定5株单抗的效价最高可达1∶819200；亚型鉴定结果显示5株单抗的重链均为IgG1，轻链均为Kappa；中和试验结果显示单抗A11-E11具有一定的病毒中和活性；免疫共沉淀试验进一步验证A11-E11株抗体能特异性结合ASFV感染的猪肺泡巨噬细胞中的K205R蛋白。综上所述，成功制备了针对ASFV K205R蛋白的单克隆抗体，该抗体对K205R蛋白具有较好的特异性，为进一步研究K205R蛋白的生物学功能奠定了基础，同时为非洲猪瘟诊断技术的建立提供了材料。

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