检测4型牛疱疹病毒的微滴数字PCR方法的建立与应用
文献类型: 中文期刊
作者: 程悦宁;王振军;曹泽昭;王春霞;吴丹妮;周雅茜;李响;闫曼平;关继羽;张竞;张海丽
作者机构:
关键词: 牛疱疹病毒4型;微滴数字PCR;定量检测
期刊名称:中国兽医学报
ISSN: 1005-4545
年卷期: 2026 年
页码:
收录情况: 北大核心(2023版) ; ; CSCD(2025-2026年度) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2024版)
摘要: 本研究基于4型牛疱疹病毒gB基因保守区,设计并筛选特异性引物与探针,通过优化反应体系与扩增程序,建立了检测牛疱疹病毒4型病毒的微滴式数字PCR,并应用该方法对临床样品进行了检测。结果显示:ddPCR法检测BoHV-4的最适引物浓度为900 nmol/L,探针浓度为250 nmol/L,退火温度为58℃,最低检测下限为3.9 copies/μL,该方法线性范围良好(R2 > 0.99);特异性强,除BoHV-4特异性扩增外,其他常见病毒特异性试验结果均为阴性;重复性高(CV< 5%);对收集的208份牛源临床样品进行检测,结果与qPCR一致性良好。本研究建立的ddPCR方法为BoHV-4的早期感染监测、病毒载量分析及流行病学调查提供了可靠的技术支持。
分类号:
- 相关文献
[1]伪狂犬病病毒野毒株与gE基因缺失疫苗株微滴数字PCR鉴别方法的建立. 兰德松,魏澍,顾贵波,侯振中. 2018
[2]牛疱疹病毒4型SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用. 程悦宁,王振军,曹泽昭,王春霞,吴丹妮,李响,张海丽,闫曼平,张竞,关继羽. 2025
[3]转基因玉米T25数字PCR方法的建立与验证. 李夏莹,武玉花,李俊,肖晓琳,张飞燕,梁晋刚,王顥潜,张旭冬,张秀杰. 2020
[4]HSA转基因水稻二重微滴数字PCR定量检测方法研究. 李晓飞,姚晓青,闫晓红,李俊,朱莉,吴刚,罗军玲. 2022
[5]水貂犬瘟热病毒微滴数字PCR检测方法的建立与应用. 闫曼平,商金源,叶京飞,罗国良,王振军,易立,冯二凯,王春霞,赵宗正,陈明军,魏先力,高华,单晓枫,程悦宁. 2023
[6]实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测转基因成分的数据分析及其标准化研究. 张丽,曹应龙,王海英,梁晓声,卢长明. 2015
[7]胶体金免疫层析试纸条快速定量检测Asia 1型口蹄疫病毒含量方法的建立. 朱玉婵,林密,孙燕燕,孙继国,蒋韬. 2014
[8]实时荧光定量技术在食品微生物检测和研究中的应用. 李勤,盛占武,孙志高. 2006
[9]乳铁蛋白检测及应用研究进展. 郝丽媛,孙鹏,卜登攀,王建,南雪梅,杜洪. 2016
[10]胶体金免疫层析法快速定量分析粮油农产品中黄曲霉毒素B_1. 王督,张文,李培武,张奇,张兆威. 2014
[11]空心莲子草叶甲对空心莲子草控制效果的定量评价. 苏文杰,曾强国,李菲,彭梅芳,彭佳星,刘文海,万方浩. 2011
[12]14-羟基芸苔素甾醇高效液相色谱分析方法. 李秀环,李一鸣,刘苹苹,王胜翔,曹立冬. 2016
[13]实时荧光定量PCR技术在食品微生物检测和研究中的应用. 李勤,盛占武,孙志高. 2006
[14]实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测转基因成分的数据分析及其标准化研究. 张丽,曹应龙,王海英,梁晓声,卢长明. 2014
[15]复硝酚钠原药中3种有效成分的高效液相色谱分析. 曹立冬,王胜翔,李凤敏,黄啟良. 2013
[16]时间分辨荧光免疫层析试纸条在油料饼粕黄曲霉毒素B_1检测中的应用. 李静,李培武,张奇,丁小霞,张文,张兆威. 2014
[17]应用qRT-PCR方法检测鼠痘病毒在小鼠不同组织中的差异分布. 张君,成温玉,贾怀杰,牛贤云,程国锋,景志忠. 2019
[18]基于竞争性等位基因特异性PCR技术的麦芽品种纯度定性和定量检测. 蒋培基,王德良,徐东东,黄承雪,郭刚刚,栾春光,蒲彪. 2018
[19]转基因大豆MON87701品系qPCR和3D-dPCR检测方法的建立. 温洪涛,杨洋,丁一佳,张晓磊,关海涛,李亮,张瑞英. 2020
[20]超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱法同时检测细胞培养基中3种色氨酸代谢物. 刘悦,贾曼,崔婧,甘敏,陈刚. 2019
作者其他论文 更多>>
-
鸽圆环病毒的研究进展及展望
作者:王振军;刘亚乔;唐梦乐;呼延含蓉;刘丽娜;吴顺;赵宗正;刘利芳;罗国良;程悦宁;王春霞
关键词:鸽圆环病毒;研究进展;诊断技术;防控策略
-
貂源肺炎克雷伯菌毒力基因及耐药特征分析
作者:陈强;程悦宁;王咸伟;刘菘岩;付连军;朱站国;孙娜
关键词:水貂;肺炎克雷伯菌;毒力基因;耐药基因;全基因组
-
猫杯状病毒CC19-01株的分离鉴定及遗传进化分析
作者:闫曼平;单晓枫;程悦宁;冯二凯;吴顺;罗国良;王振军;王春霞
关键词:猫上呼吸道感染;猫杯状病毒;分离鉴定;同源性比对;遗传进化分析
-
牛疱疹病毒4型SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
作者:程悦宁;王振军;曹泽昭;王春霞;吴丹妮;李响;张海丽;闫曼平;张竞;关继羽
关键词:牛疱疹病毒4型;SYBR Green Ⅰ;实时荧光定量PCR;gB蛋白
-
猫疱疹病毒Ⅰ型诊断技术研究进展
作者:周雅茜;吴丹妮;唐梦乐;吴顺;张海丽;刘伟;冯二凯;王春霞;程悦宁
关键词:猫疱疹病毒Ⅰ型;诊断;分子生物学;等温扩增
-
牛病毒性腹泻病毒高免卵黄抗体的制备及评价
作者:王春霞;吴顺;唐梦乐;叶子涵;王振军;张海丽;罗国良;程悦宁
关键词:牛病毒性腹泻病毒;卵黄抗体;饱和硫酸铵
-
微生物对食用菌生长的影响及其相互作用研究进展
作者:崔嫚;邵改革;张瑞颖;杨诺林;田雨;王春霞;张庆桥;郑素月
关键词:食用菌;微生物;相互作用
