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检测4型牛疱疹病毒的微滴数字PCR方法的建立与应用

文献类型: 中文期刊

作者: 程悦宁;王振军;曹泽昭;王春霞;吴丹妮;周雅茜;李响;闫曼平;关继羽;张竞;张海丽

作者机构:

关键词: 牛疱疹病毒4型;微滴数字PCR;定量检测

期刊名称:中国兽医学报

ISSN: 1005-4545

年卷期: 2026 年

页码:

收录情况: 北大核心(2023版) ; ; CSCD(2025-2026年度) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2024版)

摘要: 本研究基于4型牛疱疹病毒gB基因保守区,设计并筛选特异性引物与探针,通过优化反应体系与扩增程序,建立了检测牛疱疹病毒4型病毒的微滴式数字PCR,并应用该方法对临床样品进行了检测。结果显示:ddPCR法检测BoHV-4的最适引物浓度为900 nmol/L,探针浓度为250 nmol/L,退火温度为58℃,最低检测下限为3.9 copies/μL,该方法线性范围良好(R2 > 0.99);特异性强,除BoHV-4特异性扩增外,其他常见病毒特异性试验结果均为阴性;重复性高(CV< 5%);对收集的208份牛源临床样品进行检测,结果与qPCR一致性良好。本研究建立的ddPCR方法为BoHV-4的早期感染监测、病毒载量分析及流行病学调查提供了可靠的技术支持。

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