文献类型： 中文期刊
作者： 张斌;叶丽君;吴琪;赵鹿如;刘一楠;梁静怡;张行健;王少辉;田明星;鲍衍清;石玉祥;祁晶晶
作者机构：
关键词： 滑液囊支原体;脂蛋白;LP53;单克隆抗体
期刊名称：中国动物传染病学报
ISSN： 1674-6422
年卷期： 2025 年
页码：
收录情况： 北大核心（2023版） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）
摘要： 本研究利用滑液囊支原体（MS）特有脂蛋白MSLP53制备单克隆抗体。将前期实验室构建好的E. coli BL21（pCold I-MSLP53）重组菌进行表达纯化，并利用纯化后的重组MSLP53(rMSLP53)蛋白免疫小鼠，取其脾细胞与SP2/0细胞进行融合制备单克隆抗体，通过蛋白包被的ELISA板筛选阳性杂交瘤细胞株并进行亚克隆，获得单克隆细胞株。随后通过Western blot及间接免疫荧光试验鉴定该单克隆抗体与MS菌的反应性及与其它禽病原的交叉反应性。成功表达并纯化了rMSLP53蛋白，其分子量大小约为55 kDa；通过ELISA成功筛选到阳性单克隆杂交瘤细胞1F1-H10-A6；Western blot及间接免疫荧光(IFA)试验结果显示，该单克隆细胞分泌的抗体能特异性识别rMSLP53蛋白及MS不同分离株，与其他禽病原无非特异性反应；单克隆亚型鉴定结果显示，该单克隆抗体的抗体亚型为IgG2a型。本研究成功制备了MSLP53蛋白的单克隆抗体，并鉴定了该单克隆抗体的保守性与特异性，为研究MS的特异性抗体及检测方法提供了重要的数据及生物材料支持。
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