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农杆菌介导法获得转pac1基因小麦并表现对大麦黄矮病毒的抗性

文献类型： 中文期刊

作者： 郑银英;张文蔚;肖红;李世访;成卓敏

作者机构：

关键词： pac1;农杆菌介导法;小麦;转基因;抗病毒;大麦黄矮病毒

期刊名称：科学通报

ISSN： 0023-074X

年卷期： 2006 年 51 卷 16 期

页码： 1906-1912

收录情况： 北大核心

摘要： 自裂殖酵母中克隆得到pac1基因,与GenBank中相关的核苷酸序列有99.3%的相似性.编码蛋白质序列分析表明,其具有RNaseⅢ结构域和双链RNA结合结构域.体外活性测定表明,以pET-5a系统在大肠杆菌中表达的pac1产物能够降解dsRNA.将pac1导入双元载体pBI121,以培养7~10d的小麦幼胚为受体材料,利用农杆菌株LBA4404对小麦品种陇鉴127进行转化,获得了41株G418抗性植株,经点杂交(dotblot)、RT-PCR和nptⅡELISA检测证实,其中25株整合有外源基因并能正常表达.对这25株转基因小麦进行大麦黄矮病毒的抗性鉴定表明,有12株表现低度抗性,表现为低接毒量时无症状,接毒量提高时发病且严重;有12株表现中度抗性,表现为低接毒量时无症状,接毒量提高时局部有不严重症状;有1株表现高度抗性,两种情况下均无症状.抗性实验结果表明了pac1介导的抗性具有剂量效应的特点.

分类号： S512.1

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