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抗逆大豆IND-??41?-5转化体特异性定性PCR检测方法的建立及其标准化

文献类型： 中文期刊

作者： 肖芳;李允静;武玉花;李俊;高鸿飞;翟杉杉;吴刚;梁晋刚

作者机构：

关键词： 转基因;抗逆大豆IND-??41?-5;转化体特异性;定性PCR

期刊名称：中国油料作物学报

ISSN： 1007-9084

年卷期： 2024 年 46 卷 05 期

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 抗逆大豆IND-??41?-5已经批准获得我国进口用作加工原料的安全证书，含有外源HaHB4基因和bar标记基因。本研究根据抗逆大豆IND-??41?-5转化体5′端和3′端插入位点旁侧序列信息，设计19对引物，结合罗萨里奥农业生物技术学院公司的1对引物，针对20对引物组合利用定性PCR技术进行引物特异性筛选，结果显示5′端的14号引物特异性良好，优化后获得最佳反应体系和反应程序；经测试，该引物特异性好、稳定性高，检出限达0.1%，扩增片段大小248 bp。经8家有资质实验室对本方法的特异性、检出限、重复性和再现性进行验证，各项参数均达到国家标准要求。本研究成功建立了抗逆大豆IND-??41?-5转化体定性PCR检测方法，为IND-??41?-5转化体在国内的安全监管提供技术支撑。

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