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口蹄疫病毒非结构蛋白3A、3B和2C基因的表达及产物纯化与活性检测

文献类型： 中文期刊

作者： 付元芳;卢曾军;曹轶梅;郭建宏;张小丽;田美娜;刘在新;才学鹏

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;非结构蛋白;酶联免疫电转移印迹技术（EITB）

期刊名称：微生物学报

ISSN： 0001-6209

年卷期： 2008 年 48 卷 6 期

页码： 790-795

收录情况： CSCD

摘要： 【目的】口蹄疫病毒（FMDV）非结构蛋白（NSP）3A、3B和2C基因的表达及产物纯化与活性检测。【方法】利用原核表达系统表达了FMDV NSP 3A、3B和富含B细胞抗原位点序列的2C蛋白。利用高浓度尿素裂解包涵体，采用稀释法和氧化型、还原型谷胱甘肽系统相结合方法对2C蛋白进行复性。用金属鳌合亲合层析的方法对表达的FMDV NSP 3A、3B和2C进行纯化。采用ELISA方法对比检测了3种纯化蛋白在检测羊血清NSP抗体的效果。【结果】检测得知3A和3B为可溶性表达蛋白，2C以包涵体形式表达。通过Western-blot分析，表明纯化后蛋白能与FMDV感染动物血清发生特异性反应。纯化的3A、3B和复性后的2C融合蛋白与3ABC抗原的检测结果具有很高的符合性。【结论】该研究为建立鉴别FMDV自然感染动物和灭活疫苗免疫动物的酶联免疫电转移印迹技术（EITB）提供了所需的材料。

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