数字农科院2.0

稳定表达猪Mx2蛋白的PK-15细胞系构建及鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 王彩荷;梁玉斌;孙普;赵志荀;王润泽;李平花;卢曾军;杜晓华;刘霞;马雪青

作者机构：

关键词： II型黏病毒抗性蛋白(Mx2);慢病毒包装;PK-15细胞系;伪狂犬病病毒(PRV)

期刊名称：微生物学通报

ISSN： 0253-2654

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版）

摘要： 【背景】猪Mx2蛋白是Mx蛋白家族中的一员，属于干扰素诱导的GTP酶，在宿主抗病毒免疫反应中发挥关键作用。【目的】为探究猪Mx2蛋白的功能特性，本研究旨在通过慢病毒载体系统构建稳定表达猪Mx2蛋白的PK-15细胞系。【方法】根据GenBank数据库中猪Mx2基因的核苷酸序列设计特异性引物，扩增出目的基因后构建重组慢病毒质粒，利用三质粒系统转染HEK293T细胞包装慢病毒，将获得的重组慢病毒感染PK-15细胞，经嘌呤霉素筛选，获得稳定表达猪Mx2蛋白的PK-15细胞系，使用CCK-8法对细胞系的活力进行检测，利用Western blot方法分析构建细胞系的猪Mx2蛋白表达水平，并利用实时荧光定量PCR、Western blot和TCID50评价细胞系对伪狂犬病病毒（PRV）复制的影响。【结果】结果表明，成功构建了稳定表达猪Mx2蛋白的PK-15细胞系。与野生型PK-15细胞相比，猪Mx2蛋白稳定表达细胞系中猪Mx2表达量显著上升，且对PRV的复制具有抑制作用。【结论】本研究成功构建了稳定表达猪Mx2蛋白的PK-15细胞系，并证实其对PRV复制具有显著抑制作用。该细胞系的构建为深入探究猪Mx2蛋白的功能特性以及抗病毒作用机制提供了重要的工具。

分类号：

  • 相关文献

[1]猪伪狂犬病病毒天津变异株R13139对猪的致病性研究. 任卫科,张莉,李秀丽,池晶晶,田向学,李富强,董志民,鄢明华,仇华吉. 2018

[2]过表达TPL2蛋白PK-15细胞系的建立及其功能验证. 郝军红,闫鸣昊,张大俊,张学刚,申超超,徐国伟,李国丽,张克山,郑海学,刘湘涛. 2020

[3]过表达HDAC6基因的Vero细胞系建立及其对狂犬病病毒增殖效率评价. 殷娟斌,张志雄,王莎莎,马小琴,梁正基,孙跃峰,王相伟,殷相平. 2022

[4]稳定表达KCTD1基因的PK15细胞系构建及其对FMDV和VSV复制影响的初步研究. 张艳,董苏洁,张志东,李彦敏. 2025

[5]过表达JMJD6基因的293T细胞系的构建及对水疱性口炎病毒增殖效率的评价. 黄梦瑶,杨帆,杨洋,邵文华,王家丽,吕岳芹,赵晓义,陈治彤,曹伟军,张伟,郑海学. 2024

[6]猫源TMED10蛋白过表达稳转细胞株的构建及其应用. 孙亚娟,袁莉刚,张达,汤傲星,刘光清,朱杰. 2024

[7]利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建Nup155基因敲除的PK-15细胞系. 孙瑜嘉,殷娟斌,刘瀛,李可卿,曹轶梅,朵红,卢曾军,赵志荀,张强. 2024

[8]过表达KLHL34基因的HEK-293T细胞系的构建及对水疱性口炎病毒增殖的影响. 陈创伟,张伟,邵文华,吴魏,牛艺璇,刘泓屹,赵晓义,曹伟军,郑海学,杨帆. 2025

作者其他论文 更多>>