文献类型： 中文期刊
作者： 王东升;于瑞明;张莉萍;白英杰;刘霞;王永录;杜晓华;刘新生
作者机构：
关键词： 猪δ冠状病毒;截短N蛋白;IgG抗体;间接ELISA
期刊名称：生物工程学报
ISSN： 1000-3061
年卷期： 2025 年
页码：
收录情况： EI（2025版） ; ; 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版）
摘要： 为了建立一种猪丁型冠状病毒（porcine deltacoronavirus， PDCoV）抗体检测方法，将PDCoV CH/XJYN/2016毒株N基因序列插入原核表达质粒pColdII载体中，表达重组蛋白PDCoV-N1和PDCoV-N2，经SDS-PAGE分析和Ni-NTA Superflow Cartridge纯化后检测重组原核蛋白PDCoV-N1和PDCoV-N2与猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus， PEDV）阳性血清的反应原性和特异性。同时对重组真核蛋白PDCoV-N1和PDCoV-N2进行Western blotting和间接免疫荧光实验验证分析。最后以重组原核蛋白PDCoV-N2建立间接ELISA方法，优化反应条件，检测敏感性、特异性及重复性，并对102份临床血清进行了检测。重组原核蛋白PDCoV-N2与PEDV抗血清交叉反应较低。以PDCoV-N2蛋白制备的间接ELISA方法的最优条件为：抗原包被浓度1.25 μg/mL，37 ℃包被1 h，BSA封闭液4 ℃过夜，血清最佳稀释浓度1:50，37 ℃孵育1 h，酶标二抗最...
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