小反刍兽疫病毒N基因部分片段克隆表达及鉴定
文献类型: 中文期刊
作者: 祁光宇;刘斌;陈晓宇;王赛错;苟慧天;黄银君;穆克斌;刘学荣
作者机构:
关键词: 小反刍兽疫病毒;N1-N5基因;搭桥PCR;原核表达;可溶性;SDS-PAGE;Western-blot
期刊名称:东北农业大学学报
ISSN: 1005-9369
年卷期: 2013 年 44 卷 09 期
页码: 86-90
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 根据GenBank中登录小反刍兽疫病毒(PPRV)Nigeria 75/1株N基因序列进行人工合成,在此基础上设计2对特异引物分别对N1、N5基因扩增和对N1和N5基因进行搭桥PCR连接,经测序分析后将N1-N5基因片段和原核表达载体pET-32a(+)相连接,构建pET-32a-N1-N5质粒。将pET-32a-N1-N5转化于TransB(DE3)原核表达感受态细胞后用IPTG诱导表达,将纯化重组蛋白进行SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定。结果表明,所表达蛋白以可溶性形式表达并具有能与PPRV阳性标准血清发生特异性反应,为建立快速检测小反当兽疫病毒抗体水平诊断方法奠定基础。
分类号: S852.65
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