美仁牦牛Akirin1基因克隆及在不同组织中的表达研究
文献类型: 中文期刊
作者: 马小勇;杨国武;杨树猛;丁考仁青;唐月琴;赵雪;张艳丽;梁春年
作者机构:
关键词: 美仁牦牛;Akirin1;成肌细胞;基因克隆;实时荧光定量PCR
期刊名称:甘肃农业大学学报
ISSN: 1003-4315
年卷期: 2023 年
页码:
收录情况: CSCD(2023-2024年度) ; ; 科技核心(2023版) ; ; 农林核心(2020版)
摘要: 【目的】Akirin1基因是调控成肌细胞分化的关键基因,克隆美仁牦牛Akirin1基因编码区(CDS)序列进行生物信息学分析,并检测该基因在各组织间的表达特征,为研究调控牦牛肌肉生长的基因功能提供理论依据。【方法】利用RT-PCR技术克隆美仁牦牛Akirin1基因CDS区序列,通过生物信息学软件分析蛋白理化性质和结构,预测蛋白信号肽和磷酸化位点及构建系统进化树;通过qPCR 技术检测Akirin1基因在美仁牦牛成年牛各组织间及胎牛肌肉中mRNA 的表达水平。【结果】结果表明,美仁牦牛Akirin1基因CDS区全长579 bp,编192个氨基酸,蛋白相对分子质量为21879.86 Da,理论等电点8.91,总平均亲水性-0.822,为亲水性蛋白;系统进化树表明美仁牦牛与普通牛和印度水牛亲缘关系最近,同源性分别为100%、98.44%;Akirin1蛋白有29处磷酸化位点,无信号肽和跨膜区,主要在细胞核中发挥生物学功能;美仁牦牛Akirin1蛋白主要是由α-螺旋和无规则卷曲组成。Akirin1基因在美仁牦牛脂肪组织中表达量最高,与其它组织比较差异显著(P<0.05),且肌肉和心脏组织中的表达量最低;胎牛背最长肌中Akirin1基因表达量显著高于成年牛(P<0.05)。【结论】对克隆出的美仁牦牛Akirin1 基因CDS 区进行生信分析发现该基因编码192个氨基酸,Akirin1蛋白为亲水性蛋白,无跨膜结构域,美仁牦牛Akirin1 基因与普通牛和印度水牛分别为100%和98.44%,表明该基因高度保守;Akirin1基因在美仁牦牛不同组织中的表达差异显著,且在胎牛背最长肌中的表达量高于成年牛,推测该基因的表达在牦牛早期的生长发育阶段发挥了重要作用。
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