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一种新型鸭呼肠孤病毒SYBRGreenⅡ荧光定量PCR方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 丁明洋;戚伟强;陈宗艳;朱杰;吴巧梅;缪秋红;李传峰;吴润;刘光清

作者机构：

关键词： 新型鸭呼肠孤病毒;S1;荧光定量PCR;熔解曲线;检测

期刊名称：中国动物传染病学报

ISSN：

年卷期： 2016 年 01 期

页码： 7-14

收录情况： CSCD

摘要： 该研究旨在建立一种快速、敏感和特异性检测新型鸭呼肠孤病毒(Novelduckreovirus,NDRV)的荧光定量PCR诊断方法。本实验以感染新型鸭呼肠孤病毒的鸭组织RNA提取物为模板,根据GenBank数据库中呼肠孤病毒S1基因全序列,设计合成了一对特异性引物,PCR扩增基因片段,将其克隆至pET-30a载体,重组质粒测序并进行同源性分析;以阳性质粒为模板,建立SYBRGreenII荧光定量PCR检测方法,并进行敏感性和特异性检测。经测序证实扩增片段与预期目的片段相符,所建立的SYBRGreenII荧光定量PCR检测S1的反应在101~108copies/uL之间具有良好...

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