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鸭RIG-Ⅰ蛋白C端helicase结构域和RD结构域的原核表达及其单克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

作者： 臧凤霞;张雅春;王伟;赵颖慧;李越;周长良;陈洪岩;孟庆文

作者机构：

关键词： 鸭RIG-Ⅰ;helicase结构域;RD结构域;原核表达;单克隆抗体

期刊名称：中国家禽

ISSN： 1004-6364

年卷期： 2014 年 36 卷 20 期

页码： 17-21

收录情况： 北大核心

摘要： 利用PCR技术将鸭维甲酸诱导基因Ⅰ(RIG-Ⅰ)helicase区和RD区部分编码序列分别进行扩增,并分别命名为c、d段;克隆到p ET30a原核表达载体,构建了重组原核表达质粒p ET30a-c和p ET30a-d,通过转化BL21(DE3)感受态菌、IPTG诱导、镍柱纯化表达蛋白,将纯化的c、d蛋白免疫小鼠制备单克隆抗体(m Ab),采用ELISA、Western blot和间接免疫荧光试验对单克隆抗体进行鉴定分析。获得鼠抗鸭RIG-Ⅰ单克隆抗体有14株与原核分段表达的c、d蛋白有良好的反应性,其中3株与真核表达的RIG-Ⅰ蛋白有良好的反应性。制备的鼠抗鸭RIG-Ⅰ单克隆抗体为RIG-Ⅰ在抗病毒天然免疫信号转导途径的研究奠定了基础。

分类号： Q78

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