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O-GlcNAc修饰水平变化对牛卵母细胞体外成熟的影响

文献类型: 中文期刊

作者: 王腾飞;冯志强;孙雅雯;赵善江;郝海生;邹惠影;杜卫华;赵学明;朱化彬;庞云渭

作者机构:

关键词: 牛;卵母细胞;O-GlcNAc修饰;OGT;OGA

期刊名称:畜牧兽医学报

ISSN: 0366-6964

年卷期: 2022 年

页码:

收录情况: 北大核心(2020版) ; CSCD(2021-2022年度) ; 科技核心(2021版) ; 农林核心(2020版)

摘要: 旨在探究O-β-N-乙酰葡糖胺(O-linked beta-N-acetylglucosamine, O-GlcNAc)修饰水平变化对牛卵母细胞体外成熟的影响。本研究以牛卵母细胞为研究对象,检测O-GlcNAc转移酶(O-GlcNAc transferase, OGT)、O-GlcNAc糖苷酶(O-GlcNAcase, OGA)及O-GlcNAc蛋白在牛体外成熟卵母细胞中的分布;;将卵丘-卵母细胞复合体分别在添加4 mmol·L-1 OGT抑制剂 BADGP和100 μmol·L-1 OGA抑制剂 PUGNAc的体外成熟液中进行体外成熟,将未添加组作为对照组,分别统计各组卵母细胞第一极体排出率和体外受精胚胎发育率,并采用荧光定量PCR和Western blot检测O-GlcNAc 蛋白、OGT、OGA、GFAT和TXNIP的mRNA和蛋白表达。结果表明,OGT和O-GlcNAc蛋白共定位于牛体外成熟卵母细胞的细胞质和细胞核中,而OGA和O-GlcNAc蛋白共定位于体外成熟卵母细胞的细胞质中,且相对集中在卵母细胞的皮质区。与对照组相比,BADGP处理组和PUGNAc处理组卵母细胞第一极体排出率((52.8 ± 5.1)% & (60.9 ± 1.9)% vs. (70.8 ± 5.4)%)和体外受精囊胚发育率((9.6 ± 4.9)% & (10.0 ± 5.8)% vs. (23.5 ±7.3)%)均显著降低(P<0.05)。BADGP处理显著降低了OGT 的表达,卵母细胞的O-GlcNAc修饰水平发生下调,OGA 的表达降低;;而在PUGNAc处理组中,卵母细胞OGA 的表达显著下调,O-GlcNAc修饰水平升高,OGT的蛋白表达显著减少;;抑制OGT显著上调己糖胺生物合成途径关键限速酶GFAT mRNA的表达,而抑制OGA则显著下调GFAT mRNA的表达;;此外,O-GlcNAc修饰水平改变显著上调了葡萄糖调控关键因子TXNIP的表达。(结论)研究结果表明,O-GlcNAc修饰水平改变会降低牛卵母细胞体外成熟及发育能力,卵母细胞通过反馈调节OGT、OGA、GFPT以及TXNIP的表达,应对O-GlcNAc修饰水平的波动。

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