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甜菜碱对猪孤雌激活胚胎体外发育的影响

文献类型： 中文期刊

作者： 李伉;陈思颍;孙雅雯;冷璇;王栋;崔凯;庞云渭

作者机构：

关键词： 甜菜碱;猪;胚胎;孤雌激活;m6A修饰

期刊名称：畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 旨在探究甜菜碱对猪孤雌激活胚胎体外发育能力的影响。本研究于屠宰场采集猪离体卵巢，在实验室抽取卵丘-卵母细胞复合体，经体外成熟、孤雌激活后，在添加不同浓度甜菜碱(0、0.25、0.5、1.0mmol·L-1)的培养液中进行体外培养，48h统计卵裂率，168h统计囊胚率，筛选最佳添加浓度；利用Hoechst33342染色统计囊胚细胞数，实时荧光定量PCR检测囊胚全能性基因（OCT4、NANOG和SOX2）表达水平；检测囊胚活性氧（reactiveoxygenspecies，ROS）和谷胱甘肽（glutathione，GSH）水平；利用免疫荧光染色检测2-cell期、4-cell期、8-cell期、桑椹胚期和囊胚期各阶段胚胎的m6A水平，并检测囊胚m6A甲基化转移酶及m6A去甲基化转移酶相关基因表达水平。各组试验均至少重复3次。结果表明，0.25 和0.5mmol·L-1甜菜碱处理组孤雌激活囊胚率显著高于对照组和1.0mmol·L-1处理组（P<0.05），其中0.5mmol·L-1组最高。与对照组相比，0.5mmol·L-1组囊胚细胞数极显著增加（P<0.01），全能性基因OCT4、NANOG和SOX2的mRNA表达显著上调（P < 0.05），囊胚ROS水平极显著降低（P < 0.01），GSH水平极其显著增加（P < 0.000 1）；0.5 mmol·L-1组8-cell期、桑椹胚期和囊胚期胚胎的m6A修饰水平和m6A甲基化转移酶相关基因（WTAP、METTL3和METT14）的表达水平显著高于对照组（P < 0.05），但m6A去甲基化转移酶相关基因（ALKBH5和FTO）的表达无显著变化。（结论）综上所述，在体外培养基中添加0.5 mmol·L-1 甜菜碱通过增强胚胎抗氧化能力、上调m6A修饰水平，显著提高猪孤雌激活胚胎体外发育能力并改善胚胎质量。

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