文献类型： 中文期刊
作者： 张洪玲;陈建飞;石照蓉;李明蔚;吴洋;郭龙军;冯力
作者机构：
关键词： 猪德尔塔冠状病毒;基质抗原2;CRISPR/Cas9;敲除细胞系
期刊名称：中国预防兽医学报
ISSN： 1008-0589
年卷期： 2022 年 44.0 卷 5 期
页码：
收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2021-2022年度） ; 科技核心（2021版） ; 农林核心（2020版）
摘要： 为探究猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)中基质抗原2(STAG2)因子对猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)复制的影响,本研究针对STAG2基因设计并合成sgRNA,将其克隆至lentiCRISPR v2载体构建重组表达质粒。将重组质粒转染至IPEC-J2细胞后,利用嘌呤霉素(Puromycin)采用有限稀释法进行亚克隆,筛选STAG2基因缺失的单克隆细胞株,并经western blot鉴定后最终获得一株STAG2缺失的单克隆稳定细胞系IPEC-J2-STAG2-/-(KO)。利用western blot方法鉴定不同代次STAG2敲除细胞的遗传稳定性,结果显示,IPEC-J2-STAG2-/-细胞具有良好的遗传稳定性。为探究STAG2基因对PDCoV复制的影响,本研究将PDCoV分别感染IPEC-J2-STAG2-/-细胞和野生型IPECJ2细胞(WT),采用荧光定量PCR、western blot方法检测细胞中PDCo V N基因m RNA转录及其蛋白表达水平。结果显示,与WT组相比,IPEC-J2-STAG2-/-细胞中PDCo V N基因m RNA转录水平及其蛋白表达水平均极显著降低(P
分类号：
- 相关文献
[1]环指蛋白31基因敲除细胞系的构建及其对口蹄疫病毒复制的影响. 周婷婷,张伟,刘华南,陈治彤,董星艳,王松豪,曹伟军,郑海学,蒲秀瑛,杨帆. 2026
[2]国内首株猪德尔塔冠状病毒(Porcinedeltacoronavirus)的分离鉴定. 陈建飞,王潇博,焦贺勋,时洪艳,张鑫,刘建波,石达,冯力. 2016
[3]猪德尔塔冠状病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用. 肖帅,刘新生,方玉珍,周鹏,张巧玲,芦延珍,董昭良,张永光,王永录,魏彦明. 2017
[4]猪德尔塔冠状病毒重组聚合酶扩增检测方法的建立与应用. 肖帅,刘新生,方玉珍,周鹏,张永光,王永录,魏彦明. 2019
[5]国内首株猪德尔塔冠状病毒(Porcine deltacoronavirus)的分离鉴定. 陈建飞,王潇博,焦贺勋,时洪艳,张鑫,刘建波,石达,冯力. 2016
[6]猪德尔塔冠状病毒S蛋白单克隆抗体的制备与鉴定. 范前进,刘秋歌,石达,王潇博,张家林,汤荣锋,陈建飞,冯力. 2021
[7]猪德尔塔冠状病毒BJ株的分离鉴定与致病性分析. 刘秋歌,王洪峰,范前进,冯力,陈建飞. 2020
[8]基于转录组测序技术分析猪德尔塔冠状病毒诱导IPEC-J2细胞中自噬相关的变化. 江珊,李秀丽,李富强,李程,陈建飞,张莉,任卫科,朱琪,冯力,鄢明华. 2023
[9]猪德尔塔冠状病毒昆明小鼠感染模型的建立. 宋俊菡,王元红,邓小莺,王俊娜,虞凌雪,王斌,周艳君,童光志,李国新. 2023
[10]猪德尔塔冠状病毒M蛋白参与病毒诱导IL-8产生的研究. 石照蓉,陈建飞,张洪玲,时洪艳,郭龙军,冯力. 2022
[11]猪德尔塔冠状病毒N蛋白原核表达及多克隆抗体制备. 叶晨倩,李智丽,叶曼青,秦文珍,杨心雨,翟雪滢,郑浩,童武,李国新,于海,童光志,单同领,娄华,孔宁. 2022
[12]基于酵母转化重组的猪德尔塔冠状病毒反向遗传系统的构建. 孙琳舒,程群,刘甜,杨心雨,秦文珍,孔宁,单同领,李有文. 2025
[13]猪δ冠状病毒与猪流行性腹泻病毒的受体结合区融合表达及免疫原性分析. 仝力心,芦延珍,于瑞明,张莉萍,刘霞,王永录,杜晓华,刘新生. 2024
[14]PDCoV N基因TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立. 马翮斯,罗灵芝,王元红,虞凌雪,李国新. 2025
[15]CRISPR/Cas9系统介导的植物基因组编辑及其应用. 王红霞,张一卉,李景娟,贺立龙,高建伟. 2018
[16]利用CRISPR/Cas9技术对燕麦乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)基因的编辑. 于东洋,王凤梧,融晓萍,武志娟,王鑫,杨燕,韩冰,田青松. 2019
[17]CRISPR/Cas9技术在植物基因功能研究和新种质创制中的应用与展望. 周焕斌. 2016
[18]CRISPR/Cas9系统介导基因组编辑的研究进展. 刘志国. 2014
[19]利用CRISPR/Cas9技术敲除水稻Pi21基因的效率分析. 范方军,李文奇,朱金燕,王军. 2016
[20]CRISPR/Cas9介导基因组编辑技术在植物基因中的研究进展. 胡颂平,吴云花,邹国兴,聂元元,杜鹃. 2016
作者其他论文 更多>>
-
油菜毯状苗联合移栽机株距控制系统设计及验证
作者：刘浩;汤庆;钱勇;黄鸣辉;吴洋;宋哲文;刘远
关键词：油菜毯状苗联合移栽机;株距控制;实时动态差分(RTK);电液比例液压控制系统
-
猪急性腹泻综合征冠状病毒RT-CPA-LFS检测方法的建立与初步应用
作者：胡泽东;张记宇;丛广义;季朝阳;石达;冯力
关键词：猪急性腹泻综合征冠状病毒;交叉引物恒温扩增;胶体金试纸条;现地检测
-
新疆巴楚县域农田土壤养分现状评价
作者：张聪;白新禄;李天乐;吴洋;师勇强;支金虎
关键词：巴楚县;土壤养分;养分含量;空间分布
-
猪副流感病毒5型的分离鉴定及进化分析
作者：高娜;张晓蓉;陈建飞;冯力
关键词：猪;副流感病毒5型;基因组测序;遗传进化
-
猪德尔塔冠状病毒S蛋白纳米颗粒的构建及免疫原性评价
作者：张晓蓉;吴建晓;高銘泽;高娜;陈建飞;冯力
关键词：冠状病毒;连接酶;纳米颗粒;小鼠;免疫原性
-
猪急性腹泻综合征冠状病毒S1蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立
作者：杨小曼;时洪艳;张燎原;张鑫;张记宇;刘大凯;冯廷帅;曾苗苗;陈建飞;石达;冯力
关键词：猪急性腹泻综合征冠状病毒;S1蛋白;间接ELISA方法;抗体检测
-
稳定表达ATP5a细胞系的建立
作者：闫浩鑫;李明蔚;吴洋;郭龙军;冯力
关键词：ATP5a;细胞系;稳定表达;IPI-2I