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DHV-Ⅰ和DEV双重荧光定量PCR方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 陈肖韩;刘海燕;苏世博;赵丽丽;陈洪岩

作者机构：

关键词： Ⅰ型鸭肝炎病毒;鸭肠炎病毒;双重荧光定量

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2021 年 51.0 卷 2.0 期

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2020-2021年度） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）

摘要： 为建立快速特异的能够鉴别诊断DHV-Ⅰ和DEV的荧光定量PCR方法,根据NCBI中Ⅰ型鸭肝炎病毒和鸭肠炎病毒的保守序列,采用Beacon Designer 7.5软件,设计了2对特异性引物和2条用不同荧光基团标记的TaqMan探针.接着,对反应条件进行优化,验证其特异性及敏感性.结果,该方法特异性好,对鹅细小病毒、番鸭细小病毒、禽流感病毒、新城疫病毒、鸭坦布苏病毒、禽网状内皮增生病毒、禽呼肠弧病毒、减蛋综合征病毒、鸭甲肝病毒3型9种病毒检测,均无荧光信号.而且其灵敏度高,对DHV-Ⅰ和DEV的最小检出量均为200拷贝.利用所建立的荧光定量PCR方法对江苏徐州采集的166份肛拭子进行检测,检出Ⅰ型鸭肝炎病毒13份(阳性率为7.8％),鸭肠炎病毒75份(阳性率为45％).上述结果表明,本研究建立了灵敏度高特异性强的DHV-Ⅰ和DEV双重荧光定量PCR方法.

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