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口蹄疫病毒结构蛋白 vp1 容忍外源标签的能力

文献类型： 中文期刊

作者： 李平花;马雪青;寻广谨;白兴文;孙普;袁红;卢曾军;刘在新

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;结构蛋白;外源标签

期刊名称：微生物学报

ISSN： 0001-6209

年卷期： 2016 年

页码：

收录情况： CSCD

摘要： 【目的】利用口蹄疫病毒的反向遗传操作技术，构建含不同外源标签口蹄疫病毒的全长克隆，鉴定口蹄疫病毒结构蛋白 VP1 容忍不同外源标签的能力。【方法】通过融合 PCR技术，在 FMDV O/HN/93 全长感染性克隆的 VP1 G-H 环分别引入 V5、TC12、KT3、3FLAG外源标签，构建全长质粒。全长质粒经 Not I 线化后转染表达 T7 RNA 聚合酶的稳定细胞，拯救重组病毒。RT-PCR、序列测定、间接免疫荧光鉴定病毒，噬斑和一步生长曲线分析重组病毒的生物学特性。【结果】成功拯救到表达 V5 和 KT3 表位标签的重组病毒，未能拯救到表达 TC12 和 3×FLAG 的重组病毒。V5 和 KT3 表位标签的插入均影响了口蹄疫病毒的复制能力。【结论】重组口蹄疫病毒的成功拯救为未来标记疫苗以及口蹄疫病毒作为表达载体等的研究奠定了基础。

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