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基于猪口蹄疫O型病毒结构蛋白VP1基因的mRNA疫苗制备及免疫活性研究

文献类型： 中文期刊

作者： 董金杰;王会宝;王凡;邓瑞雪;刘萍;陈苗苗;李扬帆;张勇

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;结构蛋白VP1 （VP1）;mRNA疫苗;免疫原性

期刊名称：农业生物技术学报

ISSN： 1674-7968

年卷期： 2022 年

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2020-2021年度） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）

摘要： 口蹄疫（Foot-and-mouth disease, FMD）是危害养猪（Sus scrofa domesticus）业最重要的传染病之一，疫苗免疫是防控口蹄疫的重要手段之一。由于口蹄疫病毒（Foot-and-mouth disease virus, FMDV）容易发生变异，致使候选疫苗株和流行毒株间的抗原不匹配，从而影响疫苗免疫效力和疫病预防效果。本研究根据结构蛋白VP1 （viral structural protein 1）基因序列和功能，以猪口蹄疫病毒O型毒株（O/MYA98/BY/2010株）灭活抗原为模板，扩增结构蛋白VP1基因，并与p SFV1载体连接构建重组质粒pSFV1-VP1。重组质粒经线性化、体外转录等方法处理获得的mRNA，转染BHK-21细胞并验证表达效果，然后与制备的脂质体纳米颗粒混合免疫豚鼠（Cavia porcellus），进行免疫应答水平和攻毒保护效果检测。结果表明，mRNA转染乳仓鼠肾（baby hamster syrian kidney-21, BHK-21）细胞24 h后，采用免疫荧光法（immunofluorescence assay, IFA）和Western blot法均证实VP1得到表达；mRNA疫苗免疫豚鼠后血清中特异性抗体、中和抗体、γ干扰素（γ interferon, IFN-γ）和白介素4 （interleukin 4, IL-4）均显著高于阴性对照组。试制的mRNA疫苗免疫豚鼠可以对50倍50%豚鼠感染量（50%guinea pig infectious dose, GPID50）的O/MYA98/BY/2010株攻击提供4/4保护。以上结果表明，试制的mRNA疫苗可以诱导较强的体液免疫与细胞免疫应答，免疫原性良好。本研究为研制口蹄疫紧急预防接种疫苗提供了新途径。

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