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猪源牛病毒性腹泻病毒SD0803株E2蛋白的表达及抗体制备

文献类型： 中文期刊

作者： 邓宇;蔺涛;孙春清;张宏彪;张荣;龙进学;黄律;文心田;曹三杰;童光志;袁世山;郑浩

作者机构：

关键词： 牛病毒性腹泻病毒;E2蛋白;抗体制备

期刊名称：动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2012 年 33 卷 04 期

页码： 31-35

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 表达去除SD0803E2基因跨膜疏水区的sE2蛋白并制备其抗体,为猪源BVDV诊断奠定基础。RT-PCR扩增SD0803株sE2基因,构建重组原核表达载体pGEX-4T-1-sE2,转化BL21(DE3),IPTG诱导蛋白表达,以纯化的重组蛋白为抗原免疫家兔制备多克隆抗体。采用间接ELISA、Western blot、间接免疫荧光等方法鉴定获得的抗体。结果显示,抗体效价最高可达1∶256 000;制备的抗体可与rsE2蛋白特异性结合;该抗体可特异性识别BVDV感染MDBK细胞表达的E2蛋白,显示抗体高度的特异性。成功构建pGEX-4T-1-sE2原核表达质粒,诱导其表达的蛋白免疫家兔,成功制备的猪源BVDV SD0803株E2抗体。

分类号： S852.65

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