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猪生殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白nsp4基因的表达及其产物的纯化

文献类型： 中文期刊

作者： 胡涛;才学鹏

作者机构：

关键词： 猪生殖与呼吸综合征病毒;nsp4基因;表达;纯化

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2006 年 36 卷 09 期

页码： 687-691

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据GenBank中已登录的猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)全基因组序列,设计合成了1对特异性引物,对PRRSV非结构蛋白nsp4基因进行了RT-PCR扩增,将回收的目的基因片段克隆到大肠埃希氏菌表达载体pET28a中,构建了重组质粒pET-nsp4,测序结果证实了重组质粒pET-nsp4的可靠性。将pET-nsp4转化至大肠埃希氏菌表达菌株BL21(DE3),用IPTG诱导表达,SDS-PAGE结果表明,重组菌可表达分子质量约23 ku的蛋白。经镍离子亲和层析柱(Ni-NTA)纯化,获得了高纯度的重组蛋白,Western-blot分析结果表明,nsp4重组蛋白在大肠埃希氏菌系统中获得了正确表达。

分类号： S852.65

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