一种来源于青霉的新的α-半乳糖苷酶的分离纯化及其酶学性质
文献类型: 中文期刊
作者: 密士军;柏映国;孟昆;王亚茹;姚斌
作者机构:
关键词: 丝状真菌;青霉;α-半乳糖苷酶;纯化;酶学性质
期刊名称:微生物学报
ISSN: 0001-6209
年卷期: 2007 年 47 卷 1 期
页码: 156-160
收录情况: CSCD
摘要: 从丝状真菌中筛选到一株产α-半乳糖苷酶的菌株F63,对该菌株进行了形态观察和18S rDNA序列分析,该菌株属于青霉属。采用硫酸铵沉淀、阴离子交换层析和分子筛层析等方法分离纯化了该菌株的一种α-半乳糖苷酶。经过聚丙烯酰胺凝胶电泳,此酶蛋白的分子量约为82kDa。该α-半乳糖苷酶反应的最适pH为5.0,最适温度:45℃。此α-半乳糖苷酶的热稳定性在40℃以下,pH稳定性为pH5.0-6.0。与已报道的α-半乳糖苷酶的活性都受到Ag~+的强烈抑制不同的是,该α-半乳糖苷酶受Ag~+的抑制作用不显著。以pNPG为底物的K_m值为1.4mmol/L和V_(max)=1.556mmol/L·min~(-1)·mg~(-1)。该酶可以有效降解蜜二糖、棉子糖和水苏糖,但不能降解末端含α-半乳糖苷键的多糖。通过利用质谱技术对纯化的α-半乳糖苷酶进行鉴定以及内肽的N端测序证明该蛋白为一种新的α-半乳糖苷酶。
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