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基于RTCPA-CRISPR/Cas12a的牛病毒性腹泻病毒检测方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

作者： 蒙琦;常亮;杨明;曹映辉;贺泂杰

作者机构：

关键词： 牛病毒性腹泻病毒;交叉引物恒温扩增技术;CRISPR/Cas12a;灵敏度;特异性

期刊名称：中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2025 年 33 卷 2 期

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 本研究旨在建立一种检测牛病毒性腹泻病毒的RT-CPA-CRISPR/Cas12a方法。选取BVDV的E0蛋白基因序列为基础,设计CPA特异性引物。同时,依据CRISPR/Cas12a的设计原则,设计了crRNA靶向RT-RAA扩增产物,并优化了RT-CPA-CRISPR/Cas12a反应体系,此外,借助建立的该方法,开展了临床样品的检测。结果显示:所建立的检测方法对BVDV的最低检出限为8.0 copies/μL,并具有高度特异性,对42份临床样品检测显示,该方法与传统PCR方法的一致性好,符合率能达到92.86%。该研究建立了牛病毒性腹泻病毒的RT-CPA-CRISPR/Cas12a检测方法,为该病的诊断提供了技术手段。

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