数字农科院2.0

犬冠状病毒与犬细小病毒双重荧光定量 PCR 检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 傅宇飞;李传峰;田传龙;李泽贤;麦嘉迅;程松;刘禹含;孟春春;朱杰;程国锋;刘光清

作者机构:

关键词: 犬冠状病毒;犬细小病毒;双重荧光定量PCR;鉴别诊断

期刊名称:中国动物传染病学报

ISSN: 1674-6422

年卷期: 2023 年

页码:

收录情况: 北大核心(2020版) ; ; 科技核心(2023版) ; ; 农林核心(2020版)

摘要: 根据GenBank中犬冠状病毒(CCoV)和犬细小病毒(CPV)已有基因序列设计其对应引物,通过对反应体系和扩增程序的优化,建立了CCoV和CPV双重荧光定量PCR检测方法,评估了其敏感性、特异性和重复性。结果显示,该方法最佳退火温度为60℃,引物浓度分别为CCoV 1.0 μmol/L和CPV 0.1 μmol/L,检测下限均为102 copies/μL。批内与批间的变异系数均小于2%。该方法用于检测犬腺病毒(CAV)、犬圆环病毒(CaCV)、犬瘟热病毒(CDV)、犬流感病毒(CIV)、犬副流感病毒(CPIV)均无特异性扩增。对68份临床样品的检测,结果表明CCoV阳性率为22.0%,CPV阳性率为61.8%,与普通PCR检测结果相比,本研究建立的方法更加灵敏。本研究建立的CCoV和CPV检测方法具有特异性强、灵敏度高、重复性好等优点,可用于对CCoV和CPV的鉴别诊断。

分类号:

  • 相关文献

[1]CDV和CPV及CCV多重纳米PCR检测方法的建立与应用. 罗亚坤,刘琪,蔺文成,王静,周灵,梁琳,崔尚金. 2016

[2]鉴别诊断犬细小病毒疫苗毒和野毒株PCR-RFLP方法的建立. 易立,程世鹏,王建科,罗彬,杨莘. 2009

[3]副溶血弧菌和霍乱弧菌双重荧光定量PCR快速检测方法的建立与应用. 凌娇,王权,万莹,白雪瑞,蒋蔚,潘翠玲. 2018

[4]鸡马立克氏病病毒在鸡淋巴细胞和羽髓中的复制动力学分析. 李晶梅,刘长军,张艳萍,施维松,曲鹏,刘爱玲,闫福海. 2008

[5]北京地区犬冠状病毒的分离鉴定及遗传进化分析. 王静,秦彤,由欣月,刘畅,史利军,梁琳,李金祥,崔尚金. 2019

[6]犬冠状病毒BC-1株核衣壳蛋白的原核表达及生物信息学分析. 王静,梁琳,罗亚坤,袁维峰,崔尚金. 2018

[7]犬冠状病毒流行株膜蛋白基因序列分析及其表达研究. 乔军,夏咸柱,杨松涛,高玉伟,鞠会艳,胡桂学,黄耕. 2006

[8]犬冠状病毒TN449株纤突蛋白基因的克隆、序列分析. 吕彩云,王权. 2007

[9]犬冠状病毒TN449株M基因的克隆与转移载体的构建. 张建武,王权,李健,胡永强,吕彩云,陈燕军,薛飞群,林矫矫. 2005

[10]RT-PCR检测犬粪便中的冠状病毒. 王权,张建武,李建,潘饶霖,刘佩红,陈燕军,顾惠明,胡永强,周锦萍. 2005

[11]基于S蛋白的犬冠状病毒间接ELISA检测方法的建立与应用. 曹海旭,胡博,李虹晔,李昀真,代昕宇,张成琪,李双双,张海玲,廉士珍,白雪. 2022

[12]江苏省常州地区犬冠状病毒感染临床调查分析. 陈丹清,钟秋萍,史馨瑾,陈鸿军,王建. 2021

[13]检测和鉴别犬瘟热病毒强、弱毒株的复合反转录-套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)的建立及初步应用. 司微,崔尚金,张洪英,刘立奎. 2007

[14]新城疫病毒基因型差异性单克隆抗体的制备及鉴定. 任亭亭,李仕超,詹媛,孟春春,孙英杰,宋翠萍,谭磊,封振,仇旭升,丁铲. 2015

[15]检测和鉴别犬瘟热病毒强、弱毒株的复合反转录-套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)的建立及初步应用. 司微,崔尚金,张洪英,刘立奎. 2007

[16]犬瘟热病毒野毒株与疫苗株联合RT-PCR鉴别方法的建立. 易立,程世鹏,闫喜军,王建科,罗彬,赵建军,张海玲,吴威. 2009

[17]口蹄疫病毒vp3-间接免疫荧光诊断方法的建立. 王冰,周国辉,涂亚斌,朴范泽,于力. 2008

[18]鸭坦布苏病毒病的诊断要点及防治对策. 孙红霞,黄胜海,赵守山,颜世敢. 2012

[19]口蹄疫自然感染动物与免疫动物鉴别诊断研究进展. 曹轶梅,卢曾军,刘在新,谢庆阁. 2003

[20]非典型性鸡新城疫诊断与防制. 宋继军,佟有恩,魏萍. 2011

作者其他论文 更多>>