文献类型： 中文期刊
作者： 张留哲;赵佳男;张丽琼;张裕荣;唐露;李俊良;郭慧慧
作者机构：
关键词： X染色体失活;XIST基因;重复序列;基因编辑;CRISPR/Cas12i
期刊名称：畜牧兽医学报
ISSN： 0366-6964
年卷期： 2025 年
页码：
收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）
摘要： 试验旨在利用Cas12iHIFI基因编辑技术获得敲除XIST基因华西牛细胞系。本研究使用健康成年种公牛22284#的耳缘成纤维细胞作为供体，针对牛XIST基因设计多组sgRNA，验证效率后选取6对高效的sgRNA组成3个方案进行试验，每个方案收集15份九十六孔板细胞，通过电转染方式介导基因编辑，最后使用突变细胞验证出使用的sgRNA没有出现脱靶情况。结果表明，成功构建了XIST敲除的华西牛成纤维细胞模型。试验共获得5株纯合突变细胞系及1株杂合细胞系，验证了Cas12i在高GC含量重复序列中的高效编辑能力。该研究为解析牛XCI机制及提高克隆胚胎发育效率提供了重要的实验材料和理论依据。
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