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猫冠状病毒N蛋白单克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

作者： 王俊娜;张淼;邓小莺;虞凌雪;李国新;刘光清

作者机构：

关键词： 猫传染性腹膜炎病毒;N蛋白;单克隆抗体;原核表达

期刊名称：中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2024 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 为了制备猫冠状病毒（FCoV）N蛋白单克隆抗体，构建了重组质粒pClod-sumo-N。将重组质粒转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中，诱导表达重组蛋白。SDS-PAGE结果显示，在16℃、0.1 mmol/L IPTG、诱导24 h条件下，获得了大小约70 kDa的可溶性重组N蛋白。Wester blot分析证实，该重组蛋白能与标签HIS抗体发生反应。重组蛋白用镍离子金属亲和层析柱纯化后，免疫6周龄雌性BALB/c小鼠，通过细胞融合、筛选和亚克隆，获得了1株能稳定分泌N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株（3E6B7）。Western blot与IFA结果显示该单克隆抗体能与猫传染性腹膜炎病毒（FIPV）发生特异性反应。本研究获得的单克隆抗体为FCoV N蛋白的结构和功能研究以及诊断方法的建立提供了良好的工具。

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