兔IL-15蛋白在毕赤酵母中的表达及其免疫学活性
文献类型: 中文期刊
作者: 孟庆玲;乔军;陈创夫;才学鹏;骆学农
作者机构:
关键词: 兔IL-15基因;毕赤酵母;表达;免疫学活性
期刊名称:石河子大学学报(自然科学版)
ISSN: 1007-7383
年卷期: 2008 年 26 卷 06 期
页码: 46-49
摘要: 用特异性引物扩增出兔IL-15基因片段,用KpnI和NotI双酶切后将其定向克隆到pPICZαA中,构建出重组质粒pPICZαAIL-15。将pPICZαAIL-15用SacI内切酶线性化后,电转化感受态GS115酵母细胞,用PCR法筛选阳性重组子。用1.5%的甲醇诱导重组酵母菌,取培养物上清进行重组蛋白的检测。结果SDS-PAGE电泳可在重组酵母菌培养物上清中检测到分子量为18.6kDa大小的重组蛋白。凝胶薄层扫描分析表明,3株重组酵母菌在1.5%甲醇诱导144h后,重组IL-15表达量约占培养物上清总蛋白量的6.1%~8.6%。将重组IL-15用Ni离子亲和层析纯化后,在MTT试验中表现出明显的促进淋巴细胞的增殖反应,证实表达的重组IL-15具有天然蛋白的免疫学活性。
分类号: S852.5
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