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黄芪多糖降低脂多糖对鸡巨噬细胞促炎细胞因子和TLRs mRNA转录水平影响的效应分析

文献类型: 中文期刊

作者: 刘倩;李大鹏;张宏;刘琴;王学智;李建喜;杨孝朴;张景艳

作者机构:

关键词: 黄芪多糖;鸡巨噬细胞;炎症因子;TLRs;免疫调节

期刊名称:畜牧兽医学报

ISSN: 0366-6964

年卷期: 2022 年 53 卷 09 期

页码:

收录情况: 北大核心(2020版) ; CSCD(2021-2022年度) ; 科技核心(2021版) ; 农林核心(2020版)

摘要: 黄芪多糖(APS)调节天然免疫的作用已被广为认知,但有关APS对鸡巨噬细胞(HD11)调节作用及其分子机制的研究报道鲜少。本试验以脂多糖(LPS)诱导损伤的HD11细胞为研究模型,旨在评价APS对HD11抵御LPS刺激损伤的保护作用及对信号通路中敏感TLRs mRNA转录水平的影响。采用CCK-8法确定LPS诱导细胞炎症损伤模型的最适浓度和APS最适工作浓度;结合显微观察、一氧化氮(NO)检测和乳酸脱氢酶(LDH)检测评价APS对LPS诱导损伤HD11细胞的干预作用;采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测APS对LPS诱导损伤HD11细胞的炎性细胞因子及TLR1、TLR2、TLR4、TLR15 mRNA表达的调节作用。结果表明:当LPS浓度>9.76μg·mL-1时,在2%鸡血清+1%双抗的完全培养液中培养的HD11细胞的增殖活力显著下降,且细胞的炎症损伤变化明显。当APS浓度>50μg·mL-1时,HD11细胞增殖活性持续上升,其添加剂量与细胞增殖活性呈正相关性。100μg·mL-1 APS能显著提高HD11细胞中NO、LDH的释放(P<0.05),但极显著(P<0.01)、显著(P<0.05)降低9.76μg·mL-1 LPS诱导损伤HD11细胞中NO、LDH的释放;其能显著提高HD11细胞促炎因子(IL-1β、TNF-α及iNOS)mRNA水平(P<0.05),极显著抑制IL-10 mRNA水平(P<0.01),但能极显著抑制LPS损伤HD11细胞中IFN-α、TNF-α、IL-10 mRNA水平的升高(P<0.01),显著降低LPS诱导损伤HD11细胞中IL-6、IL-1β、iNOS mRNA的升高(P<0.05)。100μg·mL-1 APS能极显著降低HD11细胞TLR2、TLR4及TLR15 mRNA转录水平(P<0.01),极显著抑制LPS诱导损伤HD11细胞TLR2 mRNA转录水平升高(P<0.01),可极显著(P<0.01)、显著(P<0.05)降低LPS诱导损伤HD11细胞TLR4、TLR15 mRNA转录水平,但对HD11细胞和LPS诱导损伤HD11细胞TLR1 mRNA转录水平均无明显作用。综上可知,APS对HD11细胞的安全浓度范围大,可通过调节TLR2、TLR4及TLR15 mRNA水平,降低LPS诱导损伤HD11细胞过度炎症反应,发挥免疫双向调节作用。

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