数字农科院2.0

适用于棉花荧光原位杂交的DNA纤维高效制备技术

文献类型： 中文期刊

作者： 彭仁海;宋国立;刘方;黎绍惠;王春英;张香娣;王玉红;王坤波

作者机构：

关键词： 棉花;荧光原位杂交;DNA纤维;高效制备

期刊名称：作物学报

ISSN： 0496-3490

年卷期： 2009 年 35 卷 03 期

页码： 412-417

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 棉花富含酚类和多糖等高分子次生化合物,细胞质浓厚,且染色体形态小、数目多、制片困难,至今还未见棉花DNA纤维制备方面的报道。本研究用"刀切引流法",在含有Triton X-100和PVP40的冰冷细胞核提取缓冲液中,用锋利的刀片切割发育一周的棉花黄化子叶以释放棉花细胞核,所得细胞核干净完整杂质少,不需要研磨和巯基乙醇等处理,方便快捷无毒害,成功率达到100%。细胞核在室温下经温和碱裂解去除染色质上的蛋白质后,以前端导引裂解液铺展载玻片,即"引流法"拉伸制备DNA纤维,避免了液体表面张力的影响,消除了因载玻片推抹用力不均而导致的DNA纤维堆积和断裂,所制备的DNA纤维平直完整、伸展程度均匀、背景清晰。用基因组和45S rDNA分别标记探针进行杂交,结果表明所制备的棉花DNA纤维适用于荧光原位杂交。本研究探索出一套简单、高效、快捷、无毒害的适宜于棉花荧光原位杂交的DNA纤维制备技术,必将为棉花基因组研究和全基因组序列的最终完成提供强有力的技术支持。

分类号： S562

  • 相关文献

[1]棉花Oligo-FISH技术建立及其初步应用. 刘玉玲,刘震,李兆国,王玉红,周忠丽,蔡小彦,王星星,王小艳,张树林,赵海燕,张振梅,王坤波,刘方,彭仁海. 2017

[2]二倍体栽培棉45SrDNA-FISH作图及核型比较. 别墅,王坤波,王春英,宋国立,孔繁玲,刘方,刘三宏,黎绍惠,张香娣,王玉红. 2004

[3]棉花体细胞染色体rDNA-FISH技术. 王春英,王坤波,宋国立,李懋学,别墅,黎绍惠,张香娣. 2001

[4]棉花GISH-NOR的初步探讨. 刘三宏,王坤波,宋国立,王春英,刘方,黎绍惠,张香娣,王玉红. 2005

[5]海岛棉A亚组和草棉及阿非利加棉单染色体鉴定. 程华,甘仪梅,刘方,蔡小彦,王春英,王玉红,王坤波. 2013

[6]染色体识别技术及其在园艺植物上的应用进展. 舒巧利,陈志,党江波,杨星,孙海艳,梁国鲁,洪棋斌,向素琼. 2017

[7]荧光原位杂交技术在动物肠道微生物定量中的应用. 奚晓琦,王加启,邓露芳,李旦,卜登攀,魏宏阳. 2008

[8]细菌人工染色体荧光原位杂交技术的应用. 娜日苏,陈献伟,冯宝刚,雷娜,赵瑞杰,关伟军,马月辉. 2010

[9]利用栽培稻C_0t-1DNA和基因组DNA比较分析斑点野生稻和短药野生稻基因组. 董正伟,柳哲胜,王德彬,蓝伟侦,覃瑞. 2007

[10]应用荧光原位杂交技术研究小冰麦异附加系TAI-27的变异. 韩方普,张相歧,卜秀玲,何孟元,郝水,马有志,辛志勇. 1998

[11]海岛棉原位杂交及核型比较. 王坤波,王文奎,王春英,宋国立,崔荣霞,黎绍惠,张香娣. 2001

[12]St基因组中的CRW同源序列在偃麦草中的FISH分析. 陆坤,徐柱,刘朝,张学勇. 2009

[13]雷蒙德氏棉一段单拷贝序列的FISH分析. 徐俊民,刘玉玲,刘方,高巧丽,彭仁海,王春英,周忠丽,王星星. 2016

[14]偃麦草基因组特异重复序列的分离与应用. 姚涵,汤才国,赵静,郑琪,李滨,郝晨阳,李振声,张学勇. 2016

[15]甘蓝RDNA及C0T-1 DNA荧光原位杂交及其核型分析. 王太霞,吴春红,黄进勇,魏文辉. 2006

[16]雷蒙德氏棉3条染色体特异BAC的筛选与定位. 刘方,甘仪梅,王春英,王玉红,蔡小彦,王坤波. 2013

[17]利用栽培稻C_0 t-1DNA和基因组DNA比较分析斑点野生稻和短药野生稻基因组. 董正伟,柳哲胜,王德彬,蓝伟侦,覃瑞. 2007

[18]不同小麦背景小簇麦双二倍体的品质、抗病性及分子细胞遗传学研究. 傅杰,周荣华,赵继新,陈漱阳,杨群慧. 2001

[19]应用荧光原位杂交和染色体配对研究八倍体小冰麦中2的染色体组构成及染色体特征. 高智,韩方普,何孟元,马有志,辛志勇. 1999

[20]新疆红花随体染色体及25SrDNA位点分析. 王力军,严兴初. 2012

作者其他论文 更多>>