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兔出血症病毒感染性克隆的优化

文献类型： 中文期刊

作者： 杨宗伟;张伟伟;陈宗;李传峰;吴润;刘光清

作者机构：

关键词： 兔出血症病毒;病毒拯救;全长cDNA

期刊名称：甘肃农业大学学报

ISSN： 1003-4315

年卷期： 2011 年 46 卷 03 期

页码： 14-18

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为避免细胞外转录步骤,使RHDV感染性克隆的转录和病毒拯救过程一步化,试验通过PCR反应在RHDV cDNA序列的5′端添加T7启动子核心序列,3′端添加具有自身切割功能的核酶核心序列.然后,将RHDV基因组的不同cDNA片段装配到pTVT转录载体中,构建了含有RHDV全长cDNA序列的重组质粒pTVT-RHDV.在转染能稳定表达T7RNA聚合酶的BHK细胞后,将收获的细胞培养物感染MA104细胞.分别用逆转录PCR、间接免疫荧光检测以及一步生长曲线等方法对拯救病毒进行了鉴定.结果表明,试验成功拯救出了RHDV,优化了RHDV感染性克隆的构建过程.

分类号： S852.65

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