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猪带绦虫六钩蚴表膜结合蛋白45WB2基因在毕赤酵母中的表达

文献类型： 中文期刊

作者： 王谨;骆学农;岳城;胡志敏;才学鹏

作者机构：

关键词： 猪带绦虫;六钩蚴表膜结合蛋白基因;毕赤酵母菌;基因表达

期刊名称：中国寄生虫学与寄生虫病杂志

ISSN： 1000-7423

年卷期： 2005 年 23 卷 3 期

页码： 171-174

收录情况： CSCD

摘要： 目的从猪带绦虫六钩蚴总RNA中扩增45WB2基因，并在甲醇酵母分泌表达载体pPIC9K中获得高效表达。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)，从孵化激活的六钩蚴克隆获得459bp的基因，亚克隆至酵母分泌表达载体pPIC9K中，经测序验证读码框正确后，重组质粒电转化毕赤酵母SMD1168菌株。用PCR方法检测结果表明，目的基因整合进毕赤酵母染色体DNA中。重组菌株用1％甲醇诱导，分别取诱导72和96h的上清和沉淀进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PACE)和蛋白质印迹(Western blotting)分析。结果重组菌株在毕赤酵母中的表达蛋白分子量为Mr 16000，表达产物占上清总蛋白量的32．8％，且能被猪囊尾蚴病患者血清识别。结论基因在毕赤酵母中成功表达，表达产物有望作为免疫原用于猪囊尾蚴病的免疫预防。

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