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猪囊尾蚴磷蛋白基因P2的克隆及在大肠杆菌中的表达

文献类型: 中文期刊

作者: 骆学农;才学鹏;陈怀涛;刘湘涛

作者机构:

关键词: 猪囊虫;磷蛋白基因;克隆;表达

期刊名称:中国人兽共患病杂志

ISSN: 1002-2694

年卷期: 2003 年 19 卷 05 期

页码: 80-84

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 本研究从猪囊尾蚴虫体中提取总RNA ,用磷蛋白特异性引物 ,通过RT -PCR扩增出 - 36 6bp的片段 ,扩增产物连接到PGEM -Teasy载体中 ,经酶切鉴定、PCR分析以及确证性测序后证明 ,所克隆的 36 6bp的片段含P2蛋白基因完整的开放阅读框。将重组质粒PGEM -P2和表达载体pProEX -HTb分别酶切后 ,亚克隆至原核表达载体 pProEX -HTb中 ,筛选阳性克隆 ,用IPTG诱导表达 ,收集不同时间的菌液进行SDS -PAGE电泳、Westernblot分析 ,结果表明 ,磷蛋白基因 p2在大肠杆菌中成功表达 ,其表达产物为分子量 15kDa的融合蛋白 ,并能被猪囊虫阳性血清所识别。

分类号: S852.7

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