细粒棘球绦虫TPx基因的克隆及序列分析
文献类型: 中文期刊
作者: 李航;李文卉;苟惠天;李永光;王艳华;张德林;贾万忠;史大中;付宝权
作者机构:
关键词: 细粒棘球绦虫;硫氧还蛋白过氧化物酶;基因克隆;序列分析
期刊名称:中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2008 年 38 卷 03 期
页码: 191-195
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 从自然感染病羊肝内收集细粒棘球绦虫(Eg)原头蚴,分别提取总RNA和基因组DNA。根据GenBank数据库中的细粒棘球绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶(EgTPx)基因序列设计1对引物,以总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增出EgTPx基因片段,同时以基因组DNA为模板扩增出对应的基因组序列。PCR产物经纯化后连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5α后,进行序列测定和生物信息学分析。结果表明,成功扩增到中国青海株细粒棘球绦虫EgTPx基因片段,其开放阅读框为582 bp,编码193个氨基酸,与已知的EgTPx基因核苷酸序列及其编码蛋白氨基酸序列的同源性均为99%,有3个碱基发生变异,分别在245,306,318位由C变为T;引起1个氨基酸变异,由Ala82变为Val82。EgTPx具有典型的2-Cys型过氧化物氧还蛋白催化性位点Cys48和Cys169,以及周围保守的FVCP和VCPA序列。EgTPx基因的开放阅读框对应的基因组序列包含2个外显子和1个69 bp的内含子。
分类号: S852.7
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