数字农科院2.0

牛冠状病毒单克隆抗体制备及亚型鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 范昊宇;蒋蔚;汪萍;宫震;韩翔舒;白航飞;刘姝悦;李月;张立雪;付修龙;杜玮;阿依江·木合塔尔;平继辉;朱启运;蒋松;夏俊

作者机构：

关键词： 牛冠状病毒;N蛋白;单克隆抗体;间接ELSIA

期刊名称：畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2025 年 57 卷 12 期

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 旨在制备牛冠状病毒(Bovine coronavirus,BCoV)单克隆抗体(MAb),为BCoV疫苗制备和建立免疫胶体金等特异性检测方法奠定基础。使用原核表达系统制备重组BCoV N蛋白，BCoV灭活全病毒液免疫BALB/c小鼠；以N蛋白和全病毒为抗原，通过间接ELISA法检测抗体效价。经细胞融合与5轮亚克隆，筛选出分泌目标抗体的单克隆细胞株。采用腹水法制备单克隆抗体并纯化，通过间接免疫荧光试验(IFA)和Western blot验证抗体反应性与特异性。结果：筛选出3株针对BCoV N蛋白的杂交瘤细胞株(2D12C、3D6E、4D1F),分泌的单克隆抗体轻链均为Kappa链，2D12C与4D1F重链为IgG2a亚型，3D6E重链为IgG1亚型；IFA试验表明3株单克隆抗体均能与BCoV发生特异性结合；Western blot证明3株单克隆抗体与BCoV和重组表达BCoV N蛋白均反应良好，且3株单克隆抗体与感染牛轮状病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒性腹泻病毒及牛副流感病毒3型的细胞均不发生特异性反应。综上，制备了3株特异性较高、生物学活性良好的BCoV单克隆抗体，为后续疫苗制备及检测方法研究奠定了基础。

分类号：

  • 相关文献

[1]牛冠状病毒N蛋白的原核表达及其单克隆抗体的制备. 梁彤,曹存,王芳,姜志刚,于德斌,徐晓静,崔久辉,贾斌,尹鑫,常继涛. 2023

[2]牛冠状病毒N蛋白单克隆抗体的制备及鉴定. 闫昭宇,孔宁,张琪,许信刚,单同领,周宏超. 2025

[3]鸡传染性支气管炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及其B细胞表位的鉴定. 宋扬,韩宗玺,邵昱昊,孔宪刚,刘胜旺. 2010

[4]抗狂犬病病毒N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定. 曾妮,宫苗苗,程朝飞,黄华欣,郭李平,李刚. 2011

[5]猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定. 冯力,孙东波,陈建飞,时洪艳,吴波平,崔晓辰,吕茂杰,刘娣,童光志. 2008

[6]一株PRRSV N蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定. 李敏华,王倩,田志军,金涛. 2019

[7]抗鸡传染性支气管炎病毒N蛋白单克隆抗体制备与鉴定. 于丹,韩宗玺,邵昱昊,李慧昕,金鑫,孔宪刚,刘胜旺. 2009

[8]小反刍兽疫病毒N蛋白单克隆抗体的制备及其阻断化学发光抗体检测方法的建立. 刘丹,周广青,吴锦艳,曹小安,李玲霞,杜国玉,兰喜,刘永生,尚佑军. 2021

[9]猪急性腹泻综合征冠状病毒核衣壳蛋白单克隆抗体的制备及其抗体序列的分析. 曹丽艳,孔祥雨,李想通,索学鹏,段月月,袁聪,施磊,张宇,马国祥,郑海学,王琦. 2023

[10]猫冠状病毒N蛋白单克隆抗体的制备. 王俊娜,张淼,邓小莺,虞凌雪,李国新,刘光清. 2024

[11]赤羽病病毒N蛋白原核表达及单克隆抗体的制备. 林永玉,石正旺,罗俊聪,朱昱茜,席韬,周静,张帆,石鑫泰,王川,田宏,郑海学. 2024

[12]尼帕病毒N蛋白单克隆抗体制备. 曹雅清,孙彤,刘英楠,刘静宜,陈鸿军,贾杏林. 2024

[13]猪德尔塔冠状病毒N蛋白单克隆抗体制备及双抗体夹心ELISA方法建立. 王田田,于瑞明,张莉萍,白英杰,张中旺,潘丽,张全伟,刘新生. 2025

[14]猫冠状病毒N蛋白单克隆抗体的制备及鉴定. 刘佳佳,符建海,孙亚杰,许丽文,李双双,白雪,胡博. 2026

[15]表达牛冠状病毒S1基因的重组人腺病毒的构建及鉴定. 周国辉,于力,魏萍. 2010

[16]牛冠状病毒交叉引物扩增快速检测方法的建立. 唐豪,贺泂杰. 2023

[17]吉林省肉牛冠状病毒感染状况调查及分析. 孙飞雁,叶京飞,魏宇,王子贤,张金玉,邴丽媛,孟婷婷,王帅,赵立峰,孙亮,郭利. 2022

[18]牛冠状病毒纳米PCR检测方法的建立及初步应用. 孙飞雁,李智杰,魏宇,孙亮,王喜伟,王楠,叶京飞,冯二凯,郭利. 2021

[19]茯苓多糖参与调节BCoV诱导的宿主细胞IFN-β信号通路细胞因子的表达. 贺泂杰,崔东安,唐豪,王玲,杨峰,王胜义. 2023

[20]一起新生肉犊牛腹泻的病原学鉴定. 韩宇鑫,梁彤,曹存,于德斌,王芳,姜志刚,徐晓静,崔久辉,程延彬,王蕾,尹鑫,常继涛. 2024

作者其他论文 更多>>