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茶氨酸生物合成工程菌的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 王贤波;王丽鸳;成浩;周健

作者机构：

关键词： γ-谷氨酰转肽酶;茶氨酸;重组菌;构建

期刊名称：第四届海峡两岸茶业学术研讨会论文集

ISSN：

年卷期： 2006 年

页码： 8

收录情况： CSCD

摘要： 以EscherichiacoliDH5a菌液为模版进行PCR扩增,产物经纯化后用KpnI和XhoI双酶切,回收γ-谷氨酰转肽酶基因目的片断,并与经相同双酶切的表达载体pET-32a连接,得到重组质粒pET-GGT。将重组质粒转化到EcoliBL21中,获得重组菌。重组菌株经IPTG诱导后,SDS-PAGE结果显示出明显的特征蛋白质条带,每克湿菌体的酶活达到2．0U／ml,大约是出发菌株EcoliDH5a的15倍。重组菌催化L-谷氨酰胺和盐酸乙胺反应生成茶氨酸的产量达到29．40g／L,L-Gln的转化率为48．22％,其催化L-谷氨酰胺和盐酸乙胺反应生成茶氨酸的能力比出发菌...

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