文献类型： 中文期刊
作者： 周艳君;薛强;安同庆;仇华吉;童光志;王云峰;田志军;王玫;蔡雪辉
作者机构：
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;单克隆抗体;核衣壳蛋白
期刊名称：中国预防兽医学报
ISSN： 1008-0589
年卷期： 2005 年 27 卷 06 期
页码：
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 本研究是利用我国PRRS病毒分离株CH-1a株浓缩的病毒抗原免疫BAL B/c小鼠,经3次免疫后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,同时以PRRS病毒作为抗原进行间接ELISA检测,共筛选到22个阳性细胞株。分别经过3轮单克隆后,最终得到了16株能稳定分泌抗体的单细胞克隆株。利用IDEXX-ELISA检测试剂盒和IFA试验对16株单克隆抗体进行鉴定,结果证实所获得的16株细胞分泌的抗体都是针对PRRSV的特异性抗体。将此16株单克隆抗体分别与用原核系统表达的PRRSV N蛋白r、tM和rtGP5蛋白进行特异性ELISA检测试验,结果表明16株单克隆抗体都仅识别表达的N蛋白,而与其它两种蛋白不发生反应,说明所获得的16株单克隆抗体均为抗PRRSV核衣壳蛋白的。单克隆抗体亚型鉴定试剂盒的鉴定结果显示,除01MAb为IgG2b、N1H11为IgG2a外,其余的单克隆抗体均为IgG1,而且所有单克隆抗体的轻链均为κ链。至此证实我们获得了16株PRRV N蛋白单克隆抗体,这将为今后建立更为灵敏的检测PRRS病原的特异性诊断方法、分析PRRSV核衣壳蛋白的功能及鉴定B细胞抗原表位奠定重要基础。
分类号： S852.65
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