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1株共表达ASFV P30和P54蛋白的PRV重组病毒的构建及鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 包玮玲;孙依慧;李磊;王东丽;董一凡;周艳君;单同领;高飞;郑浩;姜一峰;于海;韦祖樟;童光志;徐彦召;童武

作者机构：

关键词： 非洲猪瘟病毒;伪狂犬病毒;重组病毒

期刊名称：中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 非洲猪瘟和伪狂犬病均是影响养猪业健康发展的重大传染病。本研究旨在构建能高效共表达非洲猪瘟病毒P30和p54蛋白的重组伪狂犬病病毒双基因缺失毒株。以PGE2D为转移载体与不含TAA终止密码子的目的基因PT-p3054进行同源重组连接并筛选后构建出转移载体质粒rPRV-p3054。利用同源重组技术，将线性化回收的rPRV-p3054与伪狂犬双基因缺失毒株JS-2012-EGFP-△gE/gI共转染，从而得到共表达非洲猪瘟病毒P30和p54蛋白替换掉EGFP表达框的JS-2012-ΔgE/gI-p3054。通过基因测序、蛋白质免疫印迹（Westernblot）、间接免疫荧光（IFA）和动物实验表明插入的非洲猪瘟病毒P30、P54蛋白基因在载体病毒JS-2012-△gE/gI中均能稳定且高效表达。通过一步生长曲线、噬斑形态观察、仔猪毒力测试及仔猪病理学评估，表明重组病毒JS-2012-ΔgE/gI-p3054和亲本毒JS-2012-△gE/gI基本相似。本研究为非洲猪瘟新型病毒活载体疫苗的研制提供技术支持。

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