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铁蛋白与犬α干扰素的融合表达及抗病毒活性检测

文献类型： 中文期刊

作者： 宋若楠;刘春草;李航;王真真;贾楠楠;朱杰;李传峰;程松;梁留存;刘光清;王金泉;孟春春

作者机构：

关键词： 铁蛋白;犬α干扰素;融合表达;抗病毒活性

期刊名称：中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2022 年

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; 科技核心（2021版） ; 农林核心（2020版）

摘要： 为获得治疗犬病毒性传染病的特效药物，本研究将铁蛋白与犬α干扰素进行融合表达。首先根据GenBank中公布的犬α干扰素序列（IFN2a）合成模板，通过融合PCR连入铁蛋白编码基因的上游，并将该重组基因克隆至原核表达载体pCold-TF中，获得重组质粒pCold-TF-CaIFN2a-Fe。转化BL21后用异丙基-β-D硫代半乳糖苷（IPTG）诱导，经聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE），蛋白免疫印迹（Western blot）鉴定，获得约89 kD的可溶性重组目的蛋白。重组蛋白经镍柱纯化后，使用犬肾细胞/水疱疹性口炎病毒（MDCK/VSV）微量细胞病变抑制法检测抗病毒活性，效价确定为8×104 IU/mg，显示出良好的应用前景。

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