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猪圆环病毒3型Cap蛋白的原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 王帅勇;汪琪;朱世强;姚云;虞凌雪;刘晓敏;单同领;郑浩;周艳君;童武;李国新;高飞;童光志;于海

作者机构：

关键词： 猪圆环病毒3型 ; 原核表达 ; Cap蛋白

期刊名称：中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2021 年 29.0 卷 5.0 期

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）

摘要： 为获得具有良好抗原性的猪圆环病毒3型(PCV3)Cap重组蛋白,根据本实验室已测序获得的1株全基因组序列设计特异性引物,以阳性病料中提取的病毒DNA基因组为模板,通过PCR方法扩增得到PCV3的去核定位信号的Cap蛋白基因,将目的片段插入到pCold TF载体中构建pCold TF-dPCV3-Cap重组质粒,然后将其转化至表达宿主菌BL21(DE3)中,通过优化表达和纯化条件,最终获得纯度较高的Cap重组蛋白.SDS-PAGE分析表明,该蛋白能够在上清液中大量表达,并且在IPTG终浓度为1 mmol/mL、16℃诱导20 h的条件下表达量最高;Western blot结果证实通过磁珠纯化后的目的蛋白与PCV3阳性血清能够发生特异性反应.因此,重组Cap蛋白具有良好的反应原性和特异性,可以作为研制PCV3多表位基因工程疫苗和血清抗体诊断方法的候选靶抗原.

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