猪圆环病毒2型ORF3基因的克隆及原核表达
文献类型: 中文期刊
作者: 杨晓燕;刘航;杨顺利;尹双辉;尚佑军;田永强
作者机构:
关键词: 猪圆环2型;ORF3;原核表达
期刊名称:湖南农业科学
ISSN: 1006-060X
年卷期: 2012 年 03 期
页码: 120-122
摘要: 以细胞总基因组提取试剂盒抽提PCV2细胞毒株总DNA为模板,用特异性引物扩增PCV2 ORF3基因。将ORF3和表达载体pGEX-6p-1用BamH I和Sal I双酶切回收后连接,将测序验证为阳性的重组质粒命名为pGEX-6p-1-ORF3。重组质粒pGEX-6p-1-ORF3转化BL21(DE3)后用IPTG诱导表达并纯化,对获得的表达产物进行SDS-PAGE电泳、Western blot检测。结果表明:PCV2 ORF3在pGEX-6p-1中获得了高效表达,其表达蛋白主要以包涵体形式存在,其分子质量约为37 kD,且能够和PCV2阳性血清发生特异性相互作用,具有免疫学活性。
分类号: S852.659.2
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