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口蹄疫病毒样颗粒在毕赤酵母中的表达与鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 李志要;尹双辉;郭慧琛;鲍恩东

作者机构：

关键词： 口蹄疫病毒;病毒样颗粒;真核表达;毕赤酵母

期刊名称：南京农业大学学报

ISSN： 1000-2030

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： [目的]预防和控制严重影响畜牧业发展的口蹄疫病毒（Foot-and-mouth disease virus，FMDV）灭活苗在其病毒增殖生产过程中依然存在病毒泄露风险，研发具有与病毒粒子结构相似，且不含有核酸的病毒样颗粒（Virus-like particles，VLPs）、并通过毕赤酵母真核表达系统进行表达，来生产成本更加低廉的理想FMDV VLPs疫苗。[方法]为此，本研究首先将FMDV的VP0、VP3和VP1表达盒插入到同一个pPink-HC质粒上，再电转毕赤酵母以制备FMDV VLPs。[结果]试验结果显示，重组菌经过甲醇诱导后，蛋白免疫印记（Western blot，WB）可以检测到目的蛋白的表达；破碎离心后上清液经过蔗糖梯度离心可以分离得到纯化后的VLPs；通过动态光散射法（Dynamic light scattering，DLS）和透射电子显微镜（Transmission electron microscope，TEM）检测，可以观察到直径为30 nm的球形颗粒；通过ELISA检测，VLPs呈现出良好反应，这充分表明所制备的VLPs具备抗原性。VLPs经过ELISA检测后具有良好的反应，说明制备的VLPs具有抗原性。[结论]上述结果说明，采用单独表达VP0、VP3和VP1的方式在毕赤酵母中可成功制备FMDV VLPs，这为FMD疫苗的发展及其他小RNA病毒样颗粒的制备提供了实验依据。

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