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携带荧光蛋白UnaG的口蹄疫病毒复制子系统的构建及其鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 李雪彤;黄园园;郭祥龙;张韵;孙世琪;郭慧琛;吴金恩

作者机构：

关键词： UnaG;口蹄疫病毒;复制子

期刊名称：中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2025 年 7 期

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 为构建携带荧光蛋白(UnaG)的口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)亚基因组复制子系统,本研究以FMDV全长cDNA质粒为模板,通过双酶切去除FMDV的部分结构蛋白和非结构蛋白,应用表达绿色荧光蛋白UnaG的报告基因序列替换FMDV的部分结构蛋白基因序列,成功构建FMDV-UnaG复制子.经PCR和测序验证后,将线性化的FMDV-UnaG复制子转染至表达T7 RNA聚合酶的BSR/T7细胞,并采用荧光显微镜和激光共聚焦技术观测荧光信号.结果表明,构建的FMDV-UnaG复制子能够有效表达UnaG蛋白且该蛋白与FMDV的3A蛋白存在共定位现象.此外,通过Western blot和RT-qPCR也分别检测到该复制子RNA可以表达病毒的非结构蛋白并且在BSR/T7细胞中能够进行自主复制.总之,FMDV-UnaG亚基因组复制子的成功构建为后续深入研究FM-DV的复制和翻译机制及发展疫苗载体等提供了有利工具.

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