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基于反向遗传学技术的C端FLAG标签标记M蛋白重组新城疫病毒的构建与拯救

文献类型: 中文期刊

作者: 侯岳池;张萍;邱斯薇;王菁;刘昌海;陈礼斌;谭磊;丁铲;任涛

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关键词: 新城疫病毒;反向遗传技术;M蛋白;FLAG标签

期刊名称:中国动物传染病学报

ISSN: 1674-6422

年卷期: 2025 年

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收录情况: 北大核心(2023版) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2024版)

摘要: 新城疫病毒(NDV)是一种对禽类具有高度致病性的病原体,同时因其对人类肿瘤细胞的靶向性而展现出溶瘤潜力。NDV的基质蛋白(M蛋白)在病毒生命周期中发挥重要作用,但其免疫原性较弱,难以引发强烈的免疫反应,从而给抗体制备带来了困难。本研究利用反向遗传学技术,在NDV Herts/33株M蛋白的C端成功插入FLAG标签,构建了重组病毒rHerts/33-M-FLAG。通过血凝效价(HA)检测、荧光显微镜观察、PCR和测序等实验,证实了重组病毒的感染性和FLAG标签的成功整合。间接免疫荧光(IFA)和Western blot分析表明,FLAG标记的M蛋白在不同感染复数(MOI)下稳定表达。生物学特性测定显示,重组病毒的滴度、致病性和生长动力学与亲本病毒相似,且在激活干扰素和炎症信号通路方面也表现出相似特性。电子显微镜观察进一步证实,重组病毒与亲本病毒在形态上无显著差异。本研究成功构建的rHerts/33-M-FLAG重组病毒为研究NDV的致病机制及其与宿主的相互作用提供了新的工具,具有重要的科学和应用价值。

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