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转基因小鼠支持细胞体外重编程为诱导多能性干细胞的研究

文献类型: 中文期刊

作者: 杜军慧;曹文广

作者机构:

关键词: 转红色荧光蛋白基因小鼠;支持细胞;体外诱导重编程;诱导多能性干细胞

期刊名称:中国畜牧兽医

ISSN: 1671-7236

年卷期: 2014 年 41 卷 11 期

页码: 184-190

收录情况: 北大核心

摘要: 试验旨在研究利用4种特定转录因子将转基因小鼠支持细胞体外重编程为诱导多能性干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS)。通过逆转录病毒载体将4种特定转录因子Oct4、Sox2、c-Myc及Klf4导入转基因小鼠支持细胞,同时以绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)空载体检测病毒感染情况。感染的支持细胞3d左右表达GFP蛋白,同时细胞开始缩小聚集,失去原有支持细胞形态,逐步形成突起样克隆,16d左右感染的支持细胞不表达GFP蛋白,形成具有典型干细胞特征的iPS细胞。碱性磷酸酶染色表明iPS细胞处于未分化状态;反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测iPS细胞可表达胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)特异性基因;体外悬滴培养可形成拟胚体(embryoid body,EBs),可分化为三胚层来源的多种细胞。

分类号: Q813.5

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