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东北梅花鹿Galectin-1基因RNAi载体的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 秦欣欣;孙红梅;褚文辉;王大涛;郭倩倩;章秀婷;李春义

作者机构：

关键词： 鹿茸再生;galectin-1基因;RNAi;生茸骨膜细胞

期刊名称：东北农业大学学报

ISSN： 1005-9369

年卷期： 2013 年 44 卷 09 期

页码： 57-62，2

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 构建东北梅花鹿galectin-1基因特异小分子干扰RNA(shRNAs)真核干扰载体,并获得稳定感染生茸区骨膜细胞系。设计2对galectin-1 mRNA特异性shRNAs,两端分别带有ClaⅠ/MluⅠ酶切位点和一个9 nt发夹结构,通过基因克隆技术将其插入真核表达质粒pLVTHM中,构建galectin-1 shRNA表达载体,利用PCR和测序筛选出阳性质粒。将重组质粒与PPAX及pMD2.G共转染到293 t细胞中,在倒置显微镜下观察转染效果并收集、浓缩病毒质粒,感染生茸区骨膜细胞。结果表明,成功构建东北梅花鹿galectin-1基因RNAi载体,获得稳定传代被感染生茸区骨膜细胞系,为进一步研究galectin-1基因在鹿茸再生中的作用奠定基础。

分类号： S825

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