数字农科院2.0

大肠杆菌H4、H5与H23血清型三重PCR方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

作者： 王鑫慧;朱红;张贝贝;王欣宇;郭伟奇;胡剑刚;祁晶晶;田明星;邓磊;彭昊;张艳雯;鲍衍清;王少辉

作者机构：

关键词： 大肠杆菌;血清型;PCR方法;检测

期刊名称：中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 本研究针对H4、H5和H23血清型大肠杆菌，以其fliC基因作为核酸检测靶标，分别设计特异性引物，建立了一种三重PCR检测方法。经引物浓度与退火温度优化后，该方法能特异性地从H4、H5和H23血清型大肠杆菌基因组DNA中扩增出目的条带，而与其他血清型大肠杆菌或病原的基因组DNA无交叉反应，表明其具有良好的特异性。灵敏度分析结果显示，该方法对菌体的最低检测限分别为102 CFUs（H4、H5）和10? CFUs（H23），对基因组DNA的最低检测限分别为10 pg（H4、H5）和100 pg（H23）。应用于临床分离株检测时，其结果与传统血清凝集试验的符合率达88.9%。对部分差异样本的扩增产物进行测序，确认为目标fliC基因序列，表明该方法可有效补充血清凝集试验的不足。综上，本研究建立的三重PCR方法为大肠杆菌H4、H5和H23血清型的快速鉴定及流行病学调查提供了一种新的可靠技术手段。

分类号：

  • 相关文献

[1]大肠杆菌O8/O9/O149与O157血清型多重PCR方法的建立及应用. 魏娟文,朱红,张贝贝,张耀东,王瑶,姚澜,AFAYIBO Dossêh Jean Ap?tre,祁晶晶,田明星,丁铲,王桂军,于圣青,王少辉. 2022

[2]猪源致病性大肠杆菌的血清型、毒力基因及抗菌药耐药性的调查. 王秀梅,蒋红霞,廖晓萍,张万江,朱恒乾,张悦,刘雅红. 2010

[3]一株疑似外来鸡致病性大肠杆菌的分离与鉴定. 王建舫,刘兴利,刘建,赵继勋,张国中. 2008

[4]宠物源大肠杆菌的血清型和毒力基因及耐药性调查. 张美君,廖晓萍,王秀梅,朱恒乾,孙坚,孙迎,王杨,庄娜,刘雅红. 2011

[5]致奶牛乳腺炎大肠杆菌的分离与鉴定. 徐继英,刘俊林,霍生东,李宏胜,曾宪辉,陈化琦. 2012

[6]扬州地区鸡大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验. 徐树强,杨安龙,吴兆林,吴华俊. 2006

[7]肉鹅大肠杆菌病的病原分离与鉴定. 徐永荣,陈宏生,赵宝华. 2011

[8]我国部分地区奶牛乳房炎源大肠杆菌生物学特性及耐药性分析. 徐继英,刘俊林,李先波,霍生东,杨志强. 2012

[9]肉鸽大肠杆菌的分离与鉴定. 赵宝华,卜柱,徐步,高明燕,范建华. 2010

[10]广东屠猪肉样品中大肠杆菌耐药性与毒力特征的分析. 孙迎,廖晓萍,王秀梅,孙坚,刘宝涛,朱恒乾,张悦,王杨,张美君,刘雅红. 2011

[11]致狐狸眼炎大肠杆菌的生物学特性检测与致病性分析. 于莹,王少辉,贺实伟,吕娇,韩坤,白雪,陈立志. 2019

[12]鉴别大肠杆菌O 8 /O 9 血清型双重PCR方法的建立. 朱红,李妍,魏娟文,张耀东,王瑶,陶程琳,AFAYIBO Dossêh Jean Ap?tre,李涛,祁晶晶,田明星,丁铲,于圣青,王少辉. 2021

[13]大肠杆菌O8、O9和O89血清型三重PCR检测方法的建立. 恽佳蕾,何苗锋,刘润春,张梦洁,毛立,杨蕾蕾,孙敏,张纹纹,刘茂军,邹彬,王少辉,李文良. 2023

[14]国内部分地区猪源大肠杆菌分离鉴定、耐药性及生物被膜形成能力分析. 张亚南,林子竹,王晴晴,胡剑刚,郭伟奇,祁晶晶,田明星,鲍衍清,邓磊,石玉祥,王少辉. 2025

[15]肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌和鸡白痢沙门菌三重PCR检测方法建立及应用. 王晴晴,郭伟奇,胡剑刚,张亚南,祁晶晶,田明星,鲍衍清,邓磊,石玉祥,王少辉. 2025

[16]市售鸡肉产品的食源性致病微生物检测的研究. 孙晓明,张海妍,张松山,孙宝忠. 2010

[17]豆粕中转基因成分检测方法的研究. 梁克红,李俊,李军国,秦玉昌. 2008

[18]基于等位特异的PCR方法对我国牛瑟氏泰勒虫的多态性分析. 刘爱红,关贵全,刘军龙,李有全,马米玲,牛庆丽,任巧云,白启,殷宏,罗建勋. 2011

[19]牛瑟氏泰勒虫与中华泰勒虫主要表面蛋白基因序列测定及进化关系分析. 刘爱红,关贵全,刘军龙,谢俊仁,李有全,殷宏,罗建勋. 2015

[20]基于不同靶基因的3种住肉孢子虫PCR检测方法比较. 孙滔,米荣升,张烨华,张世杰,张晓丽,贾海燕,曾江勇,黄燕,龚海燕,韩先干,陈兆国,赵权. 2020

作者其他论文 更多>>