辣椒干种籽酯酶同工酶的初步研究
文献类型: 中文期刊
作者: 李佩华;姚永慧;徐新宇
作者机构:
期刊名称:中国蔬菜
ISSN: 1000-6364
年卷期: 1985 年 1 卷 04 期
页码:
摘要: 植物体内的每种酶是由几个基因决定的酶的活性受调控基因和操纵基因的控制。同工酶结构的差异主要反映了基因的差异,故同工酶的电泳研究在遗传学上是有效的工具,也为分析鉴定植物品种提供了新的途径。辣椒在国内外分布极广,资源丰富,特别是一年生辣椒(C.annuum),类型、品种繁多,我们希望通过这个试验,观察比较在园艺性状上不同的辣椒种、亚种、类型和品种间在酯酶同工酶上的差异,分析它们的亲缘关系,为辣椒品种资源的整理及鉴定提供依据。 材料和方法 试验材料共22份。此材料根据苏联A.И.Филов的分类方法,可分为三个种。其中一年生辣椒(Capsicum annuum L.)包括三个亚科, 即一年生甜椒(C·annuumssp.grossum),一年生长型辛辣椒(c.annuum。sp.acerum)和一*年生小型辛辣椒(C.ann-uum s。p.microcapum)的不同类型和品种共17份;下垂辣椒(C.pendulum) 2份;多年生灌木状辣椒(C/rutescens)1份;以及待定名的2份。其学名、名称、来源详见泰 1· 每份材料取10$j’!:辣椒干种子,置于玻璃研钵l’5。,加入少量石英砂研细,再加人0.6。1酶提取液(0.021MTris一柠檬酸, PH。7.8,0.1%由拉通100X)进行匀浆,匀浆物放进2毫升的聚乙烯塑料离心管中存放于0t下,使用前于 4 oC下15000转/分离心15分钟。上清液用于垂直平板聚丙烯酸胺酯酶同工酶电泳。聚丙烯酸胺浓度是,上层胶4%,下层胶(分离胶) 7.5%,凝胶厚度jJI毫米,每样品点样120微升,采用北京六一仪器厂的产品垂直平板电泳槽,北京生化仪器厂生产的BS423型稳压电泳仪进行电泳,电压为300伏,单板电泳的起始电流为20毫安,电冰在4t条件进行,四个小时电泳完毕,每样重复六次。染色液配方为底物醋酸a一素酯,醋酸p一素酯。显色液为快蓝,用PH6.4的0.IM磷酸缓冲液进行染色。显示出清晰酶带后制成干板,长期保存。 为了使于对同工酶酶谱进行比较分析,测定酶带的相对迁移距离和表型。在下面分析时,将同工酶带的表型定为5级。 结果和讨论 1、辣椒于种子酯酸特征同工验带 从表2和图1看出,供试材料酯酶同工酶酶诺为14条,而其特征酶带,即不同辣椒材料间相似的酶带出现在酶谱中的慢带区,它们分别为EstA;、E。tA。、 EstAa 3条带,表型1单位,它们的迁移距离为5.50厘米,5.75厘米,6.00厘米,酶带宽、色深。三条带几乎连在一起,形成一条宽1厘米左右的酶带,这是辣椒属特有的酶带。 2、辣椒于种子酯酸同工因醉俗类型 分析供试的22份辣椒材料干种酯酶同工酶酶谱表型,获得四种类型,见图1 (1) I型:具有酶带为EStAI、 EstA。、EStA3、 EStAS、 EStA。、匕StAI。、EStAll和EstA;。共8条带。供试的一年生辣椒中的绝大多数材料和下垂辣椒均属此类型。 ( 2) fi型:具有酶带为EStAI、 EStA。、EStAs、 EstA。、 EStA。、 EstA,、 E。tA;。、EstAll、EstAl。和EstAl。共10条带。试材。11仅延庆大尖椒属此类型。 ( 3)血型:具有酶带EStAI、 EStA。、EstAs、 EstA。、 EstA。、 EstA,、 EstAa、EStAg、EStA10、EStAll和EStAll共11条带。试材中仅云南测辣属于此类型。 ( 4) IV型:具有酶带EStAI、 EStA。、EStA3、 EStAS、 EStA7、”EStAI。、 EStAll和EstAl。共8条带。试材中多年生灌木状辣椒(云南小米辣)和国外引入的一年生小辣椒83—180材料属于此类型。 辣椒干种酯酶同工酶酶谱分析初步结果表明,供试的一年生辣椒三个不同亚种的不同类型和品种,除延庆大关椒和83—180外的15份试材,下垂辣椒的M份试材和待定学名的云南的大树辣等虽然其园艺性状,如茎叶、花、果实和成熟期等特征特性具有明显的差异,但它们的干种子酯酶同工酶酶谱类型是一致的,同属工型,说明它们虽然园艺性状不同,而其遗传本质相似,具有密切的亲缘关系。一年生辣椒和下垂辣椒为二个亲缘关系很近的近缘种。 多年生灌木状辣椒(云南小米辣)等四份试材在酯酶同工酶酶谱中观察到,其干种子酯酶同工酶酶谱表型是不同的。小米辣和83—180属w型;待定名的涮辣属亚型;延庆大类椒属11型,说明它们在遗传本质上有差异,分别属不同类型。 本试验仅用酯酶同工酶来观察各种辣椒 (下转第34页)的亲缘关系,虽然对了解一些辣椒材料间的亲缘关系具有一定的意义,但还是很不够的,应探索利用多种同工酶分析方法深入研究。因为辣椒属有多种栽培种和野生种,其变种、类型和品种更是不计其数,至今尚未有一个理想的完整的辣椒分类系统和方法,现有的分类方法主要根据其园艺性状,很不完善。为进一步弄清各种辣椒间的亲缘关系;利用多种同工酶酶谱分析这一方法是值得重视的。辣椒干种籽酯酶同工酶的初步研究@李佩华$中国农科院蔬菜所 @姚永慧$中国农科院蔬菜所 @徐新宇$中国农科院品资所1 .1956. 2 .Genetic Resources of CapsicumIdpgr Secretariat Rome 1983, &&
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